解除颈动脉狭窄联合Rho激酶抑制剂干预对大鼠轻度认知功能障碍的影响.docVIP

　　解除颈动脉狭窄联合Rho激酶抑制剂干预对大鼠轻度认知功能障碍的影响 作者：冉昌丽 李耀彩 张其梅 张强 【摘要】 目的 观察解除颈动脉狭窄联合Rho激酶抑制剂(RKI) 治疗 对轻度认知功能障碍（MCI）氧化损伤的影响和其认知功能的改变。方法 用 SD大鼠制作重度颈动脉狭窄模型，将其随机分成4组：联合组、药物组、狭窄解除组、对照组，每组6只。联合组在颈动脉狭窄模型建立2 g/kg，药物组注射等量的法舒地尔，狭窄解除组给予解除狭窄，对照组注射等容积的生理盐水。假手术组只暴露颈总动脉但不结扎，不做任何处理。分别在2、4 in,大鼠乙醚麻醉后固定，行颈正中切口，分离皮肤和肌肉并游离双侧的颈总动脉，在颈总动脉近心侧距颈内动脉和颈外动脉分叉处约0.5 cm处用0号手术缝线将直径为0.45 mm注射器针头和颈总动脉一起扎紧打成活结,留置线头，然后小心拔出针头，局部滴少量地塞米松，同时少量青霉素(溶于生理盐水中)滴于术野中，缝合伤口。假手术组只暴露双侧颈总动脉但不结扎,其余处理同模型组大鼠。大鼠重度狭窄颈动脉面积狭窄率为 70％～99％。 　　1.3 动物分组与处理 　　重度颈动脉狭窄模型随机分成4组：药物治疗组：成模2 g/kg法舒地尔悬浮于生理盐水中腹腔给药，2次/d，连续2、4 in，使其适应环境和人的抓握等相关操作。从第2天起，分别从水池4个象限内将大鼠面向池壁放入水中，计算机监测并记录大鼠从入水开始寻找至找到并爬上透明平台的路线、所需时间(逃避潜伏期)等，即为一个训练程序，每个训练程序4次/只，每次训练间隔60 s，每天分上、下午各一个训练程序。如果大鼠2 min内未找到平台，这时潜伏期记为2 min。 　　1.5.2 空间搜索实验 　　历时1 d。定位航行试验后拆除透明平台，然后任选一个入水点将大鼠面向池壁放入水中，并记录2 min内大鼠在各象限内游泳距离和大鼠搜索平台轨迹。 　　1.6 大鼠血清SOD和MDA的测定 　　将行认知功能检测后的大鼠用水合氯醛腹腔深麻醉，迅速从左心室抽取血液后离心，保留血清，放-20℃冰箱保存。SOD采用黄嘌呤氧化酶法；MDA采用硫代巴比妥酸法；然后应用紫外线分光光度计比色法记取吸光度值（OD值），测定SOD活性水平及MDA的含量。 　　1.7 统计学处理 　　采用SPSS11.0统计软件处理数据，数据以x±s表示，多种均数之间比较用单因素方差分析，两个均数比较用t检验。 　　 2 结 果 　　2.1 大鼠颈动脉狭窄处面积狭窄率的变化 　　在解除狭窄2、4 pairment in older people〔J〕. Lancet，2002；360（9349）:19635. 　　2 Laszlo KS,Dezso N,Tamas S,et al.Carotid stenosis and the cognitive function〔J〕.J Neuro Sci,2009；283（1）：3640. 　　3 Huang L，He Z，Guo L，et al.Improvement of cognitive deficit and neuronal damage in rats ia via relative longterm inhibition of Rhokinase〔J〕.Cell Mol Neurobiol,2008；28（5）:75768. 　　4 段 炜，陈康宁，柳春雨，等.解除颈动脉狭窄治疗轻度认知功能障碍的实验研究〔J〕.国际脑血管病杂志，2006；14（6）：4137. 　　5 周振华，陈康宁，周 宇,等.可控制狭窄程度的鼠颈动脉狭窄模型建立及认知功能改变〔J〕. 中国 临床康复，2005；8(28):60524. 　　6 Derdeyn CP.Videen TO,Fritsch SM,et al.pensatory mechanisms for chronic cerebral hypoperfusion in patients a Y，Ikegaki I,et al.atsumoto Y，U inhibition of Rhokinase suppresses neointimal formation after stent implantation in porcine coronary arteries involvement of mutiple mechanisms〔J〕.Arterioscler Thromb Vasc Biol，2004；24（1）:1816.