辣椒炭疽病菌拮抗菌对辣椒的化感作用及田间试验.docVIP

　　辣椒炭疽病菌拮抗菌对辣椒的化感作用及田间试验 辣椒炭疽病菌拮抗菌对辣椒的化感作用及田间试验 辣椒炭.L.疽病(Colletotrichum capsici)是危害甜椒、辣椒生产的主要病害之一,在高温高湿条件下,流行蔓延快,危害时间长,发病田块大量落叶和烂果,通常减产20%～50%[1-3]。笔者从湖南壶瓶山国家级自然保护区的土壤中筛选到对辣椒炭疽病菌菌丝生长和分生孢子萌发有明显抑制作用的2个放线菌菌株,但其是否对辣椒种苗生长有影响,以及在田间对辣椒炭疽病的防治效果还需要进一步试验。为此,分别采用2个菌株的发酵滤液处理辣椒种子,研究其对辣椒种子萌发的影响,以及进行田间小区试验,以为进一步开发这种生防菌产品提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验地概况 　　小区试验选择在湖南省郴州市苏仙岭区蔬菜种植户的辣椒地,该地以往种植辣椒,且辣椒炭疽病发生较严重。试验地符合当地科学的农业实践(GAP)。 　　1.2供试材料 　　辣椒炭疽病病菌的拮抗菌菌株A和菌株B,由湖南壶瓶山国家级自然保护区的土壤中分离获得。供试辣椒品种为湘研10号,从湖南省农业科学院蔬菜研究所购买。 　　1.3试验方法 　　1.3.1拮抗菌培养滤液的制备。将初筛到的对辣椒炭疽病病菌有明显作用的拮抗菌菌株A和菌株B移入到高氏一号培养液中进行振荡培养48 h[4-5]。在冷冻情况下,在5 000 r/m下离心10 min,除去拮抗菌菌 落。再通过孔径为0.22 mu;m的细菌过滤器对离心后的上清液进行过滤除菌,得到菌株A和菌株B的发酵滤液,备用。 　　1.3.2放线菌培养滤液对辣椒种子的化感作用。选取经催化后已露白的供试辣椒种子200粒,每皿20粒,25 ℃保湿培养。拮抗菌培养滤液分别设为无菌水稀释10、20、50、100倍 4个浓度。3次重复,以无菌水作对照(CK)。培植期间保持培养皿内湿润。从第1颗种子出芽之日开始每日定时进行出芽率的记录,至各个培养皿出芽数不再发生变化为止。将幼苗从皿中取出,用吸水纸吸干残留水分,测量幼苗的根长和苗高,用电子天平称量鲜重,按照son等[6]提出的敏感指数(RI值)理论,计算RT值,衡量菌株培养液对辣椒种子的影响。 　　1.3.3放线菌培养液对辣椒炭疽病的小区试验。菌株A和菌株B放入高氏一号液体中培养,振荡96 h,将培养液稀释50、100和200倍后,用普通喷雾器进行喷雾,设25%施保功可湿性粉剂1 000倍液和清水作对照。每小区面积为20 m2左右,小区处理采用随机区组排列,4次重复。施药前摘除小区内所有辣椒炭疽病的病果。 　　1.4调查与计算方法 　　施药后7 d调查各小区辣椒果实上炭疽病的发生情况。每小区随机调查50个果实,按分级标准对病果进行分级,辣椒炭疽病的病果分级标准[7]:0级:无病斑;1级:病斑面积占果实面积的2%以下;3级:病斑面积占果实面积的3%～8%;5级:病斑面积占果实面积的9%～15%;7级:病斑面积占果实面积的16%～25%;9级:病斑面积占果实面积的25%以上。每次调查时记录病果数。调查时,注意观察药剂对辣椒的药害和生长发育的影响。按下列公式计算病果率、病果减少率、病情指数和防治效果: 　　病果率(%)=病果数/调查总果数100% 　　病果减少率(%)=(对数病果率-处理病果率)/对照病果率100 　　病情指数=[sum;(各级病果数相对级数值)/调查总果数9]100 　　防治效果(%)=(CK病指数-处理病指数)/CK病指数100 2结果与分析 　　2.1菌株A和菌株B培养滤液对辣椒种子的化感作用 　　菌株A和菌株B的发酵滤液.L.对辣椒种子萌芽的影响见表1。 　　按照son等提出的敏感指数(RI值)理论,当Tle;C时,RI=1-C/T;当T0表示有促进作用,RIlt;0表示有抑制作用(T为处理值,C为对照值)。菌株A和菌株B培养滤液对辣椒种子的化感作用见表2。可以发现,菌株A发酵培养滤液对辣椒幼苗茎的生长有明显的促进作用,化感效应最高可以达到0.211,并在培养液稀释浓度为10、50倍时对辣椒幼苗的根有较大的促生作用,化感效应值分别为0.429和0.506。菌株B发酵培养滤液稀释10倍时对辣椒幼苗有较明显的促进作用,但是稀释浓度为50倍时对幼苗生长有抑制作用。 　　2.2放线菌培养液对辣椒炭疽病的小区试验 　施药后7 d调查,各处理对辣椒炭疽病的防治效果见表3。可以看出,与清水对照比较,菌株A和菌株B的培养液对辣椒炭疽病具有一定的防治作用,稀释200倍后,病果减少率分别为42.11%、45.61%,防治效果分别是51.54%、49.93%。在稀释50倍时,效果最好,病果减少率分别为63.16%、59.65%,防治效果分别是63.60%、64.26%。 　　3结论与讨论 　　3.1菌株A和菌株