2.结果与讨论-中国无机分析化学.doc

纳米二氧化硅粒子的制备及对BSA结构的影响 李伟瀚，田珍珍，张怀斌( （滨州医学院 药学院，山东 烟台 264003）碱性条件水解正硅酸乙酯（TEOS）制备二氧化硅，并采用光谱法探讨对牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）结构的影响。 对BSA的结构没有发生的，。 中图分类号： 文献标识码：APreparation of Silica nanoparticles and impact on the structure of BSA LI Weihan, TIAN Zhenzhen, ZHOU Helin, WANG Yimei, XUChang, ZHANG Huaibin* （Pharmaceutical College, Binzhou Medical University, Shandong Yantai, 264003） Abstract The silicaprepard via hydrolyzing ethyl orthosilicate (TEOS)under the condition of alkalinity.The impact of silica nanoparticles on the structure of BSA was studied by by the synchronous fluorescence spectroscopy and UV-vis absorption spectroscopy. The synchronous fluorescence spectroscopy and UV-vis results also showed that SiO2 nanoparticles did not change the conformation and microenvironment near the chromophores of BSA . Keywords Silica; Bovine Serum Albumin; Synchronous Fluorescence Spectroscopy; UV-vis Absorption Spectroscopy 0 引言 纳米二氧化硅广大研究的青睐。二氧化硅在广泛的应用同时，对人体及其环境的毒性效应也日益受到人们的高度关注在分子水平上研究二氧化硅对蛋白质的毒性作用[8]。蛋白质是组成生物体的重要物质，牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin，BSA）因与人血清白蛋白具有相似的结构常作为体外模型蛋白[]。鉴于上述原因，本文制备出了二氧化硅，探讨了二氧化硅对BSA结构的影响，为二氧化硅在生物医学领域的应用安全性评价提供一些参考依据。实验 试剂仪器 正硅酸乙酯（TEOS）、氨水、异丙醇（IPA）、牛血清白蛋白（BSA）、pH=7.4的Tris-HCl缓冲溶液、无水乙醇等均为分析纯，购自国药集团；水为二次蒸馏水。Tris-HCl缓冲溶液1.0×10-5mol·L-1的4℃的冰箱中。 TG16-WS台式高速离心机（上海仪器厂），GL-2型恒温加热磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司），JEM-1400透射电子显微镜（日本株式会社）Fourier红外光谱仪（德国），TU-1901紫外可见分光光度计（北京普析），LS55荧光仪（美国, PerkinElemer） 1.2方法 .2.1 纳米SiO2粒子的制备 参照文献，量取IPA16.5mL，氨水16mL，蒸馏水28 mL于圆底烧瓶中，磁力搅拌均匀，加入1%（v:v, TEOS/IPA）的TEOS溶液60mL，搅拌20 min，然后缓慢滴加 6.0 mLTEOS，搅拌反应 6h，离心得到白色二氧化硅（SiO2），分别用乙醇、蒸馏水洗涤3次，烘箱中50℃烘干备用。 称取10.70mgSiO2纳米粒子研细，超声分散到50mL蒸馏水中。每次使用前都超声分散均匀。 .2.2 纳米SiO2粒子与BSA相互作用的 取3mLBSA溶液于石英比色皿中，SiO2分散液，混合均匀，静置5min，设定激发和发射波长的差值分别为15nm和60nm，在220-320nm范围进行同步荧光测定 将上述BSA与纳米SiO2的混合溶液在0-400nm范围内测定其紫外可见吸收光谱。 . 结果与讨论 .1 纳米SiO2粒子的表征 图1是SiO2透射电镜，SiO2纳米粒子呈球形均匀分布，直径nm。 图2是SiO2的红外，1636 cm–1处的峰是纳米二氧化硅表面羟基的特征峰，1112、796和453 cm–1处的峰分别对应于 SiO-Si 键的对称伸缩振动对称伸缩振动和弯曲振动的吸收峰952cm–1处的峰是SiOH的伸缩振动峰[1011]。 图1.