不同解离处理玉米根尖细胞有丝分裂制片与观察.doc-厦门一中.doc

不同解离处理玉米根尖细胞 有丝分裂制片与观察 孙 吉 （福建省厦门第一中学 厦门361003） 摘要：本实验用不同浓度的解离液对玉米根尖细胞进行不同解离时间的处理，观察与研究根尖细胞有丝分裂的制片效果。结果表明，用1.50 mol/L的HCl8~10 min，细胞分散均匀，染色体的个体形态清楚，且染色体未被破坏，制片效果好。 关键词：解离；玉米根尖；有丝分裂；制片与观察 The Production and Observation of Mitosis of Maize Root Tip Cell with Treatment of Different Isolation Sun Ji (Xiamen No.1 high school of Fujian, Xiamen 361003, China) Abstract: In the experiment, Maize root tip cells were treated by isolation liquid of different concentration with different isolation time, then the effect of production of mitosis of maize root tip cells were observed and researched. The result showed that the cells separated equably when the root tips were isolated for 8～10 min with 1.50 mol/L HCl, the unity shape of chromosomes were very clearhe chromosomes weren’t been destroyed and the effect of production was good. Key Words: Isolation, Maize root tip, Mitosis, Production and observation “观察植物细胞有丝分裂”实验是中学、卫校、师范院校、农、林、医学院校等专业实验课的基础实验，生物学中的遗传学、植物学、细胞学及普通生物学都涉及到此实验。通过该实验的学习，可以观察到根尖细胞染色体的变化及其特征，掌握压片制作技术，为以后进一步学习实验（如减数分裂、DNA定性鉴定、提取、纯化、染色体组型分析、带型分析等）和获取其他相关知识打下牢固的基础[1]。因此，“观察植物细胞有丝分裂”实验是一个经典实验。按照教材中“植物根尖细胞有丝分裂”实验的方法进行操作，从以往的实验情况看，该实验成功率较低(50% ~ 60%），实验效果不理想。其失败原因，除实验操作不准确外，主要是因为：①选材不当；②各期分裂细胞稀少；③细胞质、细胞核、染色体之间的染色不分明；④压片时，细胞重叠不易分离[2]。针对上述问题，本人在指导教师的指导下，查阅资料，经过反复实验、探索，并借鉴同行们的成功经验，摸索出了一种新的实验操作方案，取得了良好的实验效果，提高了实验的成功率。本人结合实际教学，改进说明如下： 1. 选材方面的改进 目前，相关教材一般以洋葱、小麦、大蒜根尖为实验材料，虽可以找到有丝分裂的细胞，但都存在这样或那样的不足：培养洋葱根尖费时又费力，由于现在的洋葱在贮存的过程中一般都要经过处理，使之不生根，这样处理过的洋葱生根量少[3]；小麦细胞染色体数目太多（2n=42），制片观察时染色体堆积在一起，不易看清；大蒜根尖细胞分裂期时间短，很容易错过最佳实验观察期（前中期—中期—早后期）[4]。相比之下，玉米种子较大且易获得足够的种子量。因此，取其萌发种子的根尖最为方便，且玉米分布广泛，在农业生产和国民经济中具有重要的应用价值；玉米染色体数目较少（2n=20），染色体大小居中偏小，是染色体研究最有用的材料之一。 2. 解离液浓度的改进 解离是决定本实验能否成功的一个关键步骤。若解离不，组织软化不够，压片时难以使细胞分散，会影响观察效果；若解离太过，容易使根尖破碎以致细胞离散，影响制片操作并难以染上颜色[5] [6]。因此，解离必须适度。按教材中的要求是用1mol/L的盐酸作为解离液60℃水解离8~10 min。但在实际操作中发现，根尖真正酥软需要20~30 min，迫于课堂时间和课时安排有限，这样用时长。本实验采用相对较高浓度的HCl作为解离液，以缩短实验时间，并取得了很好的实验效果。解离液（HCl）的浓度与解离时间过程如下1 材料与方法 1.1 材料 玉米（普通玉米，Maize） 1.2 实验方法 　1.2.1 根尖培养：种子在约60温水中浸泡1h后，放在铺有吸水纸的培养皿中