《高等微生物学》第7章 发酵工程过.docVIP

第7章 微生物发酵工程过程控制 第一节 概述 1对象： 生物作用剂(biological agents)——微生物、动物、植物，及其相关的酶制剂或组织。 生物反应器(bioreactor)——满足进行生化反应要求的容器；提取与纯化设备。 生化反应过程（bioprocess）——在生化反应器内，在人工控制条件下，利用生物作用剂进行生化反应建立工业生产过程或社会服务的过程。 下游操作（downstream process）——生化分离工程（isolation and purification）：产物的提取与纯化工艺及设备；——产品的成型、包装、上市。 3发酵工业范围 3.1微生物菌体发酵 3.2酶制剂工业 3.3微生物代谢产物发酵 3.4微生物的生物转化和酶催化 是指利用微生物细胞或其酶作为催化剂的生化反应，生产具有更在经济价值的化合物。生物转化的最终产物并不是微生物细胞生长代谢的产物，而是其酶系直接作用于底物的结果。 生物转化和酶催化反应中，即可是游离的细胞或酶，也可是固定化的细胞或酶。 催化的反应包括：脱氢、氧化、脱水、缩合、脱羧、羟化、氨化、脱氨、异构化反应等。 生物转化最明显的特点是反应特异性（反应类型）、结构位置特异性（分子结构中的位置）和立体特异性（特殊的对映体）。如甾体转化；手性药物（化合物）拆分等。 3.5微生物特殊机能的利用 3.6发酵工业的未来 4发酵工业生产一般过程 4.1原料的选择与预处理 4.2微生物菌种的选育及扩培 4.3发酵设备选择及工艺条件控制 4.4发酵产物的分离提取 4.5发酵废物的处理、回收和再利用 发酵工业生产一般过程略图： 原料预处理→ 培养基配料与灭菌 发酵→ 产物提取、成品加工 菌种扩培 种子 第2节 菌种扩培 1培养基 培养基是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需的，其组成对菌体生长繁殖、产物合成、产品的分离精制、产品质量和产量都有重要影响。 1.1培养基的营养及来源 主要有碳源、氮源、无机元素、生长因子及水、氧气等。 1）对于碳源：一般多采用糖质原料 淀粉质原料——包括精淀粉、粗淀粉（薯干、谷物）及其水解糖； 糖蜜； 其它糖质原料——果汁 其它碳源：CO2；石油类；纤维素、半纤维素、木质素等 2）对于氮源：根据需要可采用 迟效性氮原——黄豆饼，花生饼，玉米浆、蚕蛹水解物、麸皮等有机氮 速效性氮源——尿素、硫酸铵、氨水、硝酸盐等 3）根据需要，决定其它特殊微量元素和生长因子的添加。 1.2发酵培养基的选择基本原则 必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分； 有利于减少培养基原料的单耗，即提高单位营养物质所合成产物数量或最大产率； 有利提高培养和产物的浓度，以提高单位窖发酵罐的生产能力； 有处于提高产物的合成速度，缩短发酵周期； 尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化； 原料价格低廉，质量稳定，取材容易； 所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响，利于提高氧的利用率，降低能耗； 有利于产品的分离纯化，并尽可能减少产生“三废”物质。 发酵培养基的主要作用就是为了获得预期的产物，因此培养基的设计必须围绕这一中心来进行。要求营养适当丰富和完备，菌体迅速生长且健壮；糖、氮代谢符合高单位罐批的要求，能充分发挥生产菌种合成代谢产物的能力，此外还要求成本和单耗低。 2菌种的扩培 2.1种子扩培的目的 就是为发酵提供适当数量的代谢旺盛的种子，保证顺利迅速地“起酵”。足够量的活力旺盛的种子是发酵生产成功与否的第一步。 原因： 工业微生物的培养方法： （1）表面培养：又分为液态表面培养、固态表面培养。氧的供给常成为发酵的限速因素。特点是发酵周期长，占地面积大；不需要搅拌和通气，节省动力。 （2）固体培养：又分为浅盘固体培养、深层固体培养。我国传统制曲工艺。 （3）液体深层培养： 2.2菌种扩培过程 根据发酵规模的不同，种子扩培可以分为二级和多级。一般为， 1）液体培养： 试管斜面→小三角瓶→大三角瓶→一级种子罐→（二级种子→三级种子罐→……（根据不同情况决定级数））→ 2）固态培养： 试管斜面→小三角瓶（或小茄子瓶）→大三角瓶（或大茄子瓶）→曲盘 3）需要说明的是：液体培养扩培方式与固态培养扩培并不是对立的，而是根据实际工作要求，往往相互交叉进行的。 2.3影响种子质量的因素 菌种本身特性 菌种自身的生产特性从根本上决定了发酵生产的成败。只有优良的菌种才有直接生产的价值。因此菌种管理、保藏和复壮是生物技术产业化的核心、关键。 营养条件 一般来说，种子罐是培养菌体的，要保证菌种活力旺盛。因此一定要求营养丰富、完全，特别是实验室中的扩培过程中；随着扩培级数的增大，可以逐步使种子罐中培养基成分逐渐与发酵培养基接近，甚至完全相同。 培养条件 控制合适的温度、pH、通风和