不同产地布渣叶总黄酮含量及其清除自由基活性研究.docVIP

　　不同产地布渣叶总黄酮含量及其清除自由基活性研究 作者：潘天玲，李坤平，林赞菲，黄碧玲 【摘要】 目的 测定13个不同产地布渣叶样品中总黄酮含量及其清除自由基活性。方法 采用Al(NO3)3NaNO2NaOH体系比色法测定总黄酮含量，采用1,1二苯基2苦基肼自由基（DPPH·）、羟自由基（·OH）和超氧自由基（O2-·）等模型测定布渣叶总黄酮清除自由基活性。结果 各产地总黄酮含量差异较大，其中以广西来宾样品含量最高，达到了55.22 mg·g-1，平均为27.06 mg·g-1。各产地总黄酮样品均具有清除DPPH·活性，其自由基清除率随供试品总黄酮浓度的增大而提高，呈现一定的量效关系；但其清除·OH和O2-·活性与总黄酮浓度关系不明显。结论 不同产地布渣叶总黄酮含量差异较大；各产地布渣叶总黄酮均具有较好的自由基清除活性。 【关键词】 布渣叶；总黄酮；自由基；清除活性 　　Abstract:Objective To analyze the contents of total flavonoids in Microcos paniculata L. from different habitats and the radicalscavenging activity of total flavonoids. Methods Contents of total flavonoids in the extracts etry based on Al(NO3)3NaNO2NaOH reaction system, and the radicalscavenging activity toined in vitro. Results Contents of total flavonoids in Microcos paniculata L. varied g·g-1 g·g-1. All the samples had radicalscavenging activity against DPPH·, ·OH and O2-·. There a公司）；氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、乙醇、甲醇、水杨酸、双氧水、硫酸亚铁、三羟甲基氨基甲烷、邻苯三酚、盐酸均为市售分析纯。布渣叶，2008年7月～9月采自广东广州、阳江、化州、顺德、中山、沙坪、阳春、龙口、电白；广西来宾、玉林、武鸣；海南儋州等地，由广州中医药大学中药学院李卫民教授鉴定为椴树科植物破布树（Microcos paniculata L.）的叶，干燥，粉碎，备用；药材存放在广东药学院制药工程教研室。 　 　2 方 法 　　2.1 供试品溶液的制备［6，7］ 　　精密称取不同产地布渣叶各2.500 g，加入体积分数70%乙醇50 mL，于30 ℃下超声提取2次，第1次30 min，第2次20 min；合并两次滤液，减压回收至无醇味，加水至100 mL，静置，过滤，将滤液倒入已放有10 g预处理好的D101树脂的锥形瓶中，振荡吸附12 h后过滤，分别用50 mL去离子水、30 mL体积分数20％乙醇和30 mL体积分数95％乙醇洗脱；收集体积分数95％乙醇洗脱液，减压蒸干后用甲醇溶解并定容至25 mL，即得。 　　2.2 标准曲线的制备［5］ 精密称取120 ℃干燥至恒重的芦丁对照品10.2 mg，置50 mL容量瓶内，用体积分数70%乙醇溶解并稀释至刻度，即得芦丁对照品溶液。精确吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.5、3.0 mL芦丁对照品溶液于10 mL量瓶中，分别补加体积分数70％乙醇至5 mL；然后顺次加入质量分数5%NaNO2溶液0.3 mL，放置6 min，质量分数10%Al(NO3)3溶液0.3 mL，放置6 min，质量分数4%NaOH溶液4 mL，再加入体积分数70%乙醇溶液至刻度，摇匀，静置15 min后于510 nm处测定吸光度值。以吸光度A对芦丁质量（m）进行线性回归，得到回归方程：A=1.33175 m-0.00449（r=0.9989）。在0.0816～0.604 mg范围内，线性关系良好。 　　2．3 总黄酮含量的测定方法 　　取各待测样0.1mL，按上述标准曲线显色方法显色后在510 nm处测定吸光度值A，根据上述标准曲线方程 计算 总黄酮质量。 　　2.4 清除DPPH·活性测定［1，2］ 　　精密称取DPPH 2.74 mg，用95％乙醇溶解并定容至100 mL。精密量取DPPH溶液2 mL，加入 0.1 mL经适当稀释的供试品溶液，混匀，30 min后于517 nm波长处测定其吸光度值，以(1)式计算清除率。 　　E(%)=A0－AtA0×100%(1) 　　式中，E:清除率；A0：