不同产地的虫草提取物药效学比较研究.docVIP

　　不同产地的虫草提取物药效学比较研究 【摘要】 　　目的探讨不同产地虫草提取物的药效作用。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀的方法，测定耳片重量；采用比色分析测定小鼠游泳后肝糖元及血清乳酸含量以及测定小鼠注射刚果红后血中刚果红的残余量。结果在抗炎及抗疲劳作用方面青海虫草效果最佳，提高吞噬功能方面与西藏虫草效应相当。结论青海虫草在部分药效学方面具有一定的优势。 【关键词】 虫草提取物； 抗炎； 抗疲劳 　　研究表明，虫草具有抗炎、抗氧化、免疫调节等多种作用。本文对不同产地的虫草提取物的药效学作一比较研究，为道地药材的质量评价提供实验依据。现报道如下。 　 　1 材料 　　1.1 药物 青海虫草和西藏虫草，采自青海省囊谦县、玛沁县和西藏那曲地区，四川虫草委托四川省药品检验所提供样品，经 中国 药品生物制品检定所中药室鉴定为麦角菌科真菌冬虫夏草菌寄生在蝙蝠娥科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体。虫草提取物为甲醇提取物，三种虫草提取物回收率分别为19.6%，23.3%和16.1%。灌胃剂量按回收率 计算 ，将虫草提取物加入适量生理盐水中，大、小剂量分别相当于生药4 g/kg和2 g/kg，超声混悬。小鼠给药量为0.1 ml/10 g体重。刚果红，肝糖元及乳酸试剂盒购自南京建成生物工程研究所。 　　1.2 动物 昆明种小鼠（18～22）g，雌雄各半，购于中国医学 科学 院试验动物研究所。 　　1.3 统计学处理 实验数据以±s表示，应用SPSS10.0统计软件进行方差分析。 　　2 方法与结果 　　2.1 虫草提取物对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响［1，2］ 小鼠随机分为7组，每组10只。按表1的虫草种类及剂量灌胃。末次灌胃给药1 h后在每只小鼠右耳均匀涂二甲苯0.05 ml致炎。30 min后，小鼠脱颈椎处死，剪下耳壳，用直径8 mm打孔器取双侧对称处的耳片称重，以其重量差为肿胀指标，对照组灌以同等剂量的生理盐水。结果见表1。 　　表1 虫草提取物对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响（略） 　　与对照组比较，*Plt;0.05，**Plt;0.01；n=10 　　从表1可见，不同产地的虫草提取物均能抑制二甲苯致小鼠耳肿胀。青海和西藏虫草大剂量组表现出明显的炎症抑制作用，与对照组比较有统计学差异。四川虫草炎症抑制作用较弱，与对照组比较无统计学差异。 　　2.2 虫草提取物对小鼠抗疲劳实验的影响［1，2］小鼠随机分为7组，每组10只。同“2.1”项方法灌胃给药，1次/d，连续14 d，对照组灌以同等剂量的生理盐水。末次给药24 h后，小鼠置游泳箱中(水深15 cm，水温37℃)游泳，45 min后分别摘眼球取血，按试剂盒说明操作，检测全血乳酸含量及肝糖元含量。结果见表2。 　　从表2可见，在本实验中，与对照组比较，青海虫草药效最强，大、小剂量下均可使小鼠乳酸含量明显降低；西藏虫草大、小剂量也能明显降低全血乳酸含量；四川虫草在大剂量时亦表现出良好的降低乳酸的作用。四川虫草和青海虫草能明显提高运动后的肝糖原含量，西藏虫草在大剂量条件下也表现出类似作用，但强度稍弱。 　　表2 虫草提取物对小鼠体内乳酸及肝糖原含量的影响（略） 　　与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10 　　2.3 虫草提取物对小鼠刚果红吞噬功能的影响［3］小鼠随机分为7组，每组10只，按“2.1”项方法灌胃给药，1次/d，连续7 d。对照组灌以同等剂量的生理盐水。末次给药30 min后分别用经肝素处理过的毛细管从眼眶后静脉丛取血50 μl，立即放入5.0 ml蒸馏水中，使之完全溶血，作为对照管；之后从尾静脉定量注射10 mg/ml刚果红生理盐水溶液0.1 ml/10 g体重，于注射后30 s摘眼球取血50 μl，立即放入5.0 ml蒸馏水中，使之完全溶血，作为测定管，在510 nm波长下，以蒸馏水调零，检测对照管和测定管光密度，根据两者差值，从刚果红标准曲线中查出样品血中刚果红残余量。 　　刚果红标准曲线：标准浓度为5，10，15，20，25 μg/ml，以蒸馏水调零，检测510 nm处光密度，并将结果进行直线回归，得回归直线方程：Y=-0.614 5+29.676 3X,X为光密度值，Y为浓度值，r=0.995 1。结果见表3。 　　表3 虫草提取物对小鼠刚果红吞噬功能的影响（略） 　　与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；n=10 　　从表3可见，四川虫草效果稍差，只在大剂量下表现出明显促进刚果红吞噬的作用；西藏和青海虫草药效较好，其中西藏虫草的作用更好。 　　3 小结 　　本文通过研究不同产地虫草提取物的药效学作用，拟比较本省与外省(西藏、四川)虫草在抗炎及抗疲劳、提高吞噬功能方面的影响，以确定本省虫草是否具有药效学