乙丙昔罗中杂质限量检查方法的研究.docVIP

　　乙丙昔罗中杂质限量检查方法的研究 作者：杨辉 张桂明 李秀荣 郑立卿 张嫡群 【摘要】 目的：探讨薄层层析法（TLC）用于乙丙昔罗中杂质限量检查的效果。 方法 ：以硅胶GF254薄层板为吸附剂，石油醚：乙酸乙酯：冰醋酸（1.0∶0.5∶0.04,v/v）为展开剂,检测波长254nm,比较供试品与杂质斑点的大小和颜色。结果：产品所含杂质量小于1%。结论：该方法可用于乙丙昔罗的杂质限量检查，效果良好。 【关键词】 乙丙昔罗；杂质限量；薄层层析法 【ABSTRACT】 Objective: To set up a TLC method for the determination of the impurities in efaproxiral. Methods: SG GF254 for thinlayer chromatography ether: acetic ether: glacial acetic acid(1.0∶0.5∶0.04,v/v)obile phase； The UV detection . The size and color of the spot of the production and the impurity on the TLC purity quantity contained in the product is less than 1%. Conclusion: The method can be applied to the determination of the impurities in efaproxiral. 【KEY ination of impurities; TLC 2[4[[(3,5二甲基苯胺基)羰基]甲基]苯氧基]2甲基丙酸（乙丙昔罗，RSR13,efaproxiral，结构见图1）是由美国Allos therapeutics公司研制开发的新药。作为癌症放、化疗时的联合用药， 治疗 人体实体瘤如脑肿瘤、乳腺癌脑转移、非小细胞肺癌脑转移等，同时也用于治疗心肌梗死、脑中风等缺血、缺氧性疾病[1,2]。本品进入血液后，以非共价键的形式与血红蛋白结合，引起血红蛋白三维结构的变化，降低血红蛋白对氧的亲和力，促进氧释放到缺氧组织中去。乙丙昔罗仅对缺氧组织有效，而不 影响 正常组织[3]。是 目前 所合成的变构血红蛋白调节剂中与血浆蛋白结合最弱、生理活性最强的化合物[4]，目前，该药正处于临床 研究 中。 图1 乙丙昔罗在药物合成中，除主成分药物外，还可能有原料、中间体、反应副产物等杂质。因此，必须对杂质含量加以控制，并对杂质的类型、归属进行研究。在乙丙昔罗的合成中，可能存在中间体（4[[(3,5二甲基苯胺基)羰基]甲基]苯酚）或瑞穆－梯曼（REimerTimann）反应产生的芳醛等杂质。本文建立了薄层层析法（TLC）用以检测和控制产品中的杂质。 1 材料和方法 1.1 仪器与试药 YOKOZF 三用紫外线 分析 仪（武汉药科新技术开发公司），硅胶G板（自制），硅胶GF254板（自制），4[[(3,5二甲基苯胺基)羰基]甲基]苯酚(中间体，自制，纯度为99.25%)，乙丙昔罗供试品（自制），乙丙昔罗对照品（自制，纯度99.88%） 1.2 方法 1.2.1 检出条件的确定及专属性试验 取适量、等量中间体及乙丙昔罗对照品，分别溶于甲醇中，制成0.01mg/mL溶液，各吸取8μL，分别点于同一硅胶G薄层板及同一硅胶GF254薄层板上，于254nm及365nm紫外灯下检视。硅胶GF254薄层板上所点样品在254nm紫外光下呈暗斑，而硅胶G薄层板所点样品在254nm及365nm紫外光下均不显荧光或暗斑。因此，选择硅胶GF254薄层板为吸附剂。 吸取上述溶液各8μL点于同一硅胶GF254薄层板上，分别以①石油醚∶氯仿∶冰醋酸（1.0∶0.54∶0.04），②石油醚：二氯甲烷：冰醋酸（1.0∶0.95∶0.04），③石油醚∶甲醇∶冰醋酸（1.0∶0.4∶0.04），④石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸（1.0∶1.0∶0.01），⑤石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸（1.0∶0.5∶0.04）为展开剂展开，吹干。结果发现石油醚∶乙酸乙酯∶冰醋酸（1.0∶0.5∶0.04）为展开剂时，原料与产品分离度Rs=3.6，中间体Rf=0.48，产品Rf＝0.37，Rf大小适宜，分离度好，因此选择此溶剂系统为展开剂。 1.2.2 最低检测限试验 取RSR13溶于甲醇中，制成浓度为①(6.08mg/mL),②(3.04mg/mL),③(1.52mg/mL),④(0.76mg/mL),⑤(0.38mg/mL),⑥(0.19mg/mL)的溶液，吸取上述