第五章微生.pptVIP

2.通过酶的定位控制酶与底物的接触 1）真核微生物酶定位在相应细胞器上；细胞器各自行使某种特异的功能； 2）原核微生物在细胞内划分区域集中某类酶行使功能： 与呼吸产能代谢有关的酶位于膜上； 蛋白质合成酶和移位酶位于核糖体上； 同核苷酸吸收有关的酶在G-菌的周质区。 3. 控制代谢物流向： (通过酶促反应速度来调节) 1)可逆反应途径由同种酶催化，可由不同辅基或辅酶控制代谢物流向：如: 两种Glu脱氢酶： 以NADP为辅酶 Glu合成 以NAD为辅酶 Glu分解 2)通过调节酶的活性或酶的合成量： 关键酶: 某一代谢途径中的第一个酶或分支点后的第一个酶。 ①粗调：调节酶的合成量 ②细调：调节现有酶分子的活性 3)通过调节产能代谢速率。 二、代谢调节在发酵工业中的应用 工业发酵的目的：大量积累人们所需要的微生物代谢产物。 代谢的人工调节：人为地打破微生物的代谢控制体系，使代谢朝着人们希望的方向进行。 人工调节代谢的手段： 1、 改变微生物遗传特性(遗传学方法）； 2、控制发酵条件（生物化学方法）； 3、 改变细胞膜透性； 1）应用营养缺陷型菌株解除正常的反馈调节 末端产物E对生长乃是必需的，所以，应在培养基中限量供给E，使之足以维持菌株生长，但又不至于造成反馈调节，这样才能有利于菌株积累中间产物C 。 1、遗传学方法 ①对于直线式代谢途径：选育营养缺陷性突变株只能积累中间代谢产物，而不能积累最终代谢产物。 A a B b C c D d E ②分支代谢途径：情况较复杂，可利用营养缺陷性克服协同或累加反馈抑制使某一分支途径的末端产物得到积累，亦可利用双重缺陷发酵生产中间产物。 A B C D E F G ①赖氨酸发酵: 菌种：谷氨酸棒杆菌的Hom– ②肌苷酸（ IMP ）发酵 调控理论的实践应用 菌种：谷氨酸棒杆菌的酶12的腺嘌呤缺陷型 2）应用抗反馈调节的突变株解除反馈调节 ★抗反馈调节突变株——是指对反馈抑制不敏感或对阻遏有抗性，或两者兼有之的组成型菌株。 1、遗传学方法 菌种：黄色短杆菌的抗AHV突变株 菌种：黄色短杆菌的甲硫氨酸缺陷型 反馈 反馈 ——指反应链中某些中间代谢产物或终产物对该途径关键酶活性的影响。 凡使反应速度加快的称正反馈； 凡使反应速度减慢的称负反馈（反馈抑制）； 反馈抑制——主要表现在某代谢途径的末端产物过量时可反过来直接抑制该途径中第一个酶的活性。主要表现在氨基酸、核苷酸合成途径中。 特点：作用直接、效果快速、末端产物浓度降低时又可解除 协同反馈抑制——分支代谢途径中几个末端产物同时过量时才能抑制共同途径中的第一个酶的一种反馈调节方式 合作反馈抑制——两种末端产物同时存在时，共同的反馈抑制作用大于二者单独作用之和。 积累反馈抑制——每一分支途径末端产物按一定百分比单独抑制共同途径中前面的酶，所以当几种末端产物共同存在时它们的抑制作用是积累的，各末端产物之间既无协同效应，亦无拮抗作用 顺序反馈抑制——一种终产物的积累,导致前一中间产物的积累，通过后者反馈抑制合成途径关键酶的活性，使合成终止。 阻遏 概念： 是阻碍代谢过程中包括关键酶在内的一系列酶的合成的现象，从而更彻底地控制和减少末端产物的合成。 ★类型： ①末端产物阻遏（end-product repression）：由于终产物的过量积累而导致生物合成途径中酶合成的阻遏的现象，常常发生在氨基酸、嘌呤和嘧啶等这些重要结构元件生物合成的时候。 ②分解代谢物阻遏（catabolite repression）：当微生物在含有两种能够分解底物的培养基中生长时，利用快的那种分解底物会阻遏利用慢的底物的有关酶的合成的现象。最早发现于大肠杆菌生长在含葡萄糖和乳糖的培养基时,故又称葡萄糖效应。分解代谢物阻遏导致出现“二次生长（diauxic growth）”。 D A B C E F 1）添加前体绕过反馈控制点：使某种代谢产物大量产生 (-) (-) (-) 2）添加诱导剂：从提高诱导