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大蒜提取sod.doc

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大蒜提取sod

甘肃农业科 技 Gansu Agr. Sci. and Techn. No. 10 2010 2010 年 第 10 期 摘要: 引证有关文献资料,阐述了大蒜 SOD 的理化性质及其提取 、 分离纯化方法,并分析了其应用前景 。 关键词: 超氧化物歧化酶;大蒜;分离纯化;方法 中图分类号: Q554 ; S633.4 文献标识码: A 文章编号: 1001- 1463 ( 2010 ) 10- 0047- 03 Research Progress on Isolation and Purification of Superoxide Dismutase (SOD) from Garlic WANG Zhi- xin, KONG Wei- bao ( College of Life Science, Northwest Normal University, Lanzhou Gansu 730070, China ) Abstract: In this paper, the relative document material by citing related facts and data,by analyzing the physical and chemical properties of garlic SOD, extraction, isolation and purification methods, and its development prospects are reviewed respectively. Key words: Superoxide dismutase; Garlic; Isolation and purification; M ethod 大蒜超氧化物歧化酶 ( SOD ) 的提取及分离纯化方法研究综述 王志鑫,孔维宝 ( 西北师范大学生命科学学院,甘肃 兰州 730070 ) 超氧化物歧化酶 ( Superoxide Dismutase, EC1. 15.1.1 ) 简称 SOD ,是一种广泛存在于动物 、 植物 和好氧微生物细胞中的金属酶,能够催化超氧阴 离子自由基 O 2 - 发生歧化反应,平衡机体代谢过程 中产生的过多自由基,减轻或消除自由基对机体 的危害,具有抗衰老 、 免疫调节 、 抑制肿瘤 、 调 节血脂 、 抗辐射 、 消炎和美容等功效 [ 1 ] 。 SOD 是 当前生物学 、 医学以及化学研究领域中世界级的 课题之一,且在我国已有专著问世 [ 2 ] 。 大蒜是百 合科 ( Liliaceae ) 葱属植物生蒜 ( Allium sativum L. ) 的鳞茎,大蒜中 SOD 的含量比其它植物相对较高 [ 3 ] 。 从大蒜中提取 SOD ,成本低廉,因此研究大 蒜 SOD 的分离纯化方法,对 SOD 生产工艺优化及 应用具有重要意义 。 1 大蒜 SOD 的主要理化性质 根据所结合的金属辅基不同,将存在于高等 生 物 体 内 的 SOD 分 Fe- SOD 、 Mn- SOD 和 Cu/Zn- SOD 3 种,大蒜 SOD 属于 Cu/Zn- SOD [ 4 ] 。 Cu/Zn- SOD 是由两个相同亚基构成的二聚体蛋白, 每个亚基含一个铜原子和一个锌原子,相对分子 质量约为 16 kD 。 通过对其构象熔点温度的研究表 明, Cu/Zn- SOD 是迄今发现热稳定性最高的球蛋 白之一 。 Cu/Zn- SOD 的等电点在 pH 5.3 左右,其 酸碱稳定性好,在 pH 5.2 ~ 9.6 之间其催化速率与 pH 无关,在 pH 4.5 ~ 11.0 之间能稳定存在 。 与 Fe- SOD 、 M n- SOD 相比, Cu/Zn- SOD 对一些化学 试剂或变性剂的敏感性有明显的差别 [ 5 ] 。 DTT (二 巯基苏糖醇 ) 、 氰化物 、 H 2 O 2 、 SDS (十二烷基硫酸 钠 ) 和 DTDM ( 4,4 ′ - 二硫代二吗啉 ) 等对 SOD 的活 力影响显著,并可将其沉淀,但它在其它理化因 素作用下相对较稳定 [ 6 ] 。 以上性质也决定了大蒜 SOD 来源丰富 、 易于处理,生产工艺也易得到简 化 。 2 大蒜 SOD 的提取分离及纯化方法 2.1 磷酸缓冲液提取法 大蒜 SOD 极性较大,易溶于水,根据 “ 相似 相溶 ” 原理,可用水来浸取大蒜 SOD 。 但磷酸缓 冲液可提高浸取效能,增加制品的稳定性,减少 杂质,因此实际操作中常采用 pH 7.8 的磷酸缓冲 液代替水来浸取大蒜 SOD ,得到粗提取液 。 但该 收稿日期: 2010-06-28 作者简介:王志鑫 ( 1988 — ) ,男,甘肃武威人,制药工程专业在读本科生 。

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