1.2基因工程的基本操作程序学案新人教版选修三.doc

1.2 基因工程的基本操作程序 【知识新动向】 基因工程的原理及技术 【知识全景透析】 基因工程的基本操作程序 1、目的基因的获取途径 （1）目的基因： 编码蛋白质的结构基因 。 （2）获取目的基因的方法： 从基因文库中获取 利用PCR技术扩增目的基因 通过DNA合成仪人工合成 （3）PCR技术扩增目的基因 ①原理：DNA双链复制 ②过程： 第一步：加热至90～95℃DNA解链； 第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链； 第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。 2、基因表达载体的构建 是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。 （1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 （2）组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因（如抗生素基因） ①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。 ②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。 ③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。 3、将目的基因导入受体细胞 生物种类 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法 显微注射技术 Ca2＋处理法 转