PCR技术(2010级硕士)要点.pptVIP

目 录 PCR技术的创建 PCR的原理 PCR的类型和应用 PCR技术的创建 一、最初的理论描述—Khorana Khorana (1971)等最早提出核酸体外扩增的设想：“经DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可合成tRNA基因。” 但由于当时基因序列分析方法尚未成熟，热稳定DNA聚合酶尚未报道以及引物合成的困难，这种想法似乎没有实际意义。加上70年代初分子克隆技术的出现提供了一种克隆和扩增基因的途径，所以，Khorana的设想被人们遗忘了…… PCR技术的创建 二、PCR技术的发明—Kary Mullis 1985年，Kary Mullis在Cetus公司工作期间，发明了PCR Mullis要合成DNA引物来进行测序工作，却常为没有足够多的模板DNA而烦恼 1983年4月的一个星期五晚上，他开车去乡下别墅的路上…… PCR从构想成为现实 1983年12月， Mullis用同位素标记法看到了10个循环后的49 bp长度的第一个PCR片段； 1985年10月25日申请了PCR的专利，1987年7月28日批准（专利号4,683,202 ），Mullis是第一发明人； 1985年12月20日在Science杂志上发表了第一篇PCR的学术论文，Mullis是共同作者； 1986年5月，Mu