2015-2016人教版选修一DNA的粗提取与鉴定课件(28张).ppt
鸡是真核生物,真核生物的DNA都在染色体上。 鸟类的血细胞核大,DNA多 不需要破除细胞壁 问题:鸡血细胞液在取材之后,到实验前,是否需要特殊处理吗? 柠檬酸钠抗凝 问题:鸡血细胞虽然没有细胞壁,但是依然有细胞膜,以你所学的知识,有什么比较简便但是可行的方法可以破碎细胞膜? 对于动物细胞我们可以利用细胞的渗透压来破碎细胞,但是很多情况下,人们不得不面对植物材料,那么我们是不是还可以通过加入一定量的蒸馏水来涨破细胞呢? 洗涤剂的作用: 洗涤剂也分为亲水基团和亲脂基团,可以与细胞膜中的蛋白质结合,使之溶解,进而瓦解细胞膜。 食盐的作用: 食盐中主要含有NaCl,有利于DNA的溶解。 过滤:用3~4层纱布对DNA稀释液进行过滤,滤过蛋白质,收集DNA的粘稠物。 问题:这时的滤液可能含有哪些细胞成分? 主要有DNA、RNA、核蛋白、多糖等 我们应该如何将DNA单独分离出来? 用高浓度的盐溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。 缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕。同时应注意控制加水量,使NaCl溶液的终浓度为0.1~0.2mol/L,直到溶液中丝状物不再增加时为止。 方案二:直接在滤液中加入嫩肉粉,反应10-15min 嫩肉粉的主要成分是木瓜蛋白酶 蛋白酶能分解杂质蛋白,
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