功能失调性子宫出血子宫内膜组织中性激素及其受体表达变化的研究.docVIP

　　功能失调性子宫出血子宫内膜组织中性激素及其受体表达变化的研究 作者：康燕华 张彦芳 任雁林 舒丽莎 李建平 常丽锦 【摘要】 目的： 研究 育龄期功能失调性子宫出血女性子宫内膜组织中性激素及其受体的变化。 方法 ：随机采集20058～200611月河北北方学院附属第一 医院 妇产科门诊35例育龄期功血患者的静脉血及子宫内膜功能层组织，以正常月经健康女性20例排卵后期设为对照组。①采用放免法测定功血组及对照组女性血清及子宫内膜组织中雌二醇（E2）、孕激素（P）的含量；②HE染色后对子宫内膜进行组织学诊断；③用免疫组化法检测子宫内膜中雌、孕激素受体（ER、PR）的表达。结果：育龄期功血女性以排卵型为主（30/35），其子宫内膜组织中E2含量高于对照组，有统计学意义（Plt;005），而P含量低于对照组（排卵后期的子宫内膜），有统计学意义（Plt;005）；两组血清中E2、P含量无统计学差异（P均＞005），但血清、子宫内膜中E2和P呈正相关（rE2=074 PE2＜001,rP=065 PPlt;001）。结论：育龄期功血绝大多数可能是由于体内作用于子宫内膜的性激素产生的时间、数量及其受体比例失衡所致。 【关键词】 功能失调性子宫出血(DUB)；性激素；ER；PR 　　功能失调性子宫出血（dysfunctional uterine bleeding,DUB,功血）是指由于调节生殖的神经内分泌机制失常引起的异常子宫出血，发生机制 理论 上涉及到轴系、卵巢和子宫，临床上通常采用孕激素或孕/雌激素或诊刮术为 治疗 手段，而育龄期的功血在出血量、出血期及出血模式等方面基本具有 规律 性，我们推测可能更多地与子宫局部微环境有关。本研究旨在通过检测育龄期功血患者血和子宫内膜组织中性激素的含量及其受体的表达变化，进一步了解其发病机理，为其治疗提供理论依据。 　 　1 资料与方法 　　11 一般资料 随机选择20058~200611月就诊于河北北方学院附属第一医院妇产科门诊的年龄25～40岁功能性子宫出血患者35例为病例组，以同期因男方因素就诊于门诊待人工受精的年龄25～40岁的月经期规则（28±2d）、卵巢功能正常的健康女性20例为对照组，对照组标本采集时间为排卵后期。所有入选对象均近3个月未使用激素类药物及避孕器，皆签署了知情同意书。功能失调性子宫出血诊断标准按丰有吉主编的七年制《妇产 科学 》[1]中相关标准，即无生殖道器质性病变及内科疾病。 　　12 标本采集与检测 　　121 血液标本收集 所有检测对象均抽取清晨空腹时静脉血3mL，注入试管内，静置10min，以3000r/min离心10min，分离血清，-70℃保存待测。 　　122 子宫内膜取材 无菌操作,用刮匙取子宫内膜组织（即功能层）后，用冷生理盐水漂洗至内含血块洗净，吸干水分，将组织分为二份。其中一份称重，加9份生理盐水，倒入放置于冰块中的玻璃匀浆管内，充分磨碎，使组织匀浆化，然后将匀浆以2000r/min离心5min，其上清液即为10%组织匀浆，-70℃保存待测。另一份用4%多聚甲醛固定，石蜡包埋，连续4μm厚切片3张，备HE、免疫组化染色用。 　　123 血清、10%子宫内膜组织匀浆E2、P检测 采用碘[125I]—雌二醇（E2）、[125I]—孕酮（P）磁性微粒子放射免疫 分析 法测定，125I—E2、125I—P磁性微粒子放免药盒为北京科美东雅生物技术有限公司提供，灵敏度E2＜5pg/mL，Plt;005ng/mL，E2批内CV＜60%，批间CV＜77%，P批内CV＞70%，批间CV＜100%，按照药盒说明程序操作，根据样品13/130从自动γ计数仪编制的标准曲线上查出相应浓度。 　　124 ①组织切片1张常规苏木素伊红（HE）染色后，作组织学诊断，即分为增生期或分泌期。②其余2张切片分别作ER、PR免疫组化SP法染色，鼠抗人ER、PR单克隆抗体、SP系列工作液和DAB试剂盒由北京中山生物公司提供，染色按试剂盒说明操作，同步设阴性及阳性对照。结果判定，光镜下ER、PR阳性表达定位于细胞核内，为黄色或棕黄色颗粒，每例标本随机选取5个高倍视野（×400），计数约500个细胞，阳性细胞指数即为阳性细胞百分率。 　　13 统计学分析各数据用x±s表示，采用t检验及直线相关分析，Plt;005为差异有显著性意义。 　 　2 结果 　　21 35例DUB子宫内膜光镜下病理组织学诊断增生期5例，分泌期30例，显示育龄期DUB绝大多数为排卵型，对照组因取材时间为排卵后期均为分泌期。 　　22 两组血清及子宫内膜组织匀浆中E2和P水平见表1，DUB组子宫内膜组织中E2含量高于对照组，有统计学意义（P