宁心红杞胶囊高效液相色谱指纹图谱研究.docVIP

　　宁心红杞胶囊高效液相色谱指纹图谱研究 作者：汪光林，王坚，吕晔，孟长虹，陆益红 【摘要】 　　目的建立宁心红杞胶囊HPLC 指纹图谱分析方法。方法采用kromasil C18色谱柱, 乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,流速1.0 ml/min，柱温30℃，检测波长205 nm。结果对10个批号的样品进行了测定，标出21个共有峰。结论 该法快速、准确、可靠，为宁心红杞胶囊生产质量控制和药物质量评价提供了依据。 【关键词】 宁心红杞胶囊；高效液相色谱；指纹图谱 　　Abstract：ObjectiveTo establish a method of fingerprint analysis of Menoprogen by HPLC. MethodsKromasil C18 column ixtures of 0.1% phosphoric acid and acetonitrile as mobile phase in a gradient elution. The flol/min，the column temperature .ResultsTen different samples ined and 21 mon peaks of chromatogram ethod is quick,accurate,reliable and can be used for quality control of menopenry. 　　Key p，G1379A Degasser，G1313A Autosampler，G1314A Variable Sation 工作站( 美国Agilent公司)；KQ-250DE型医用数控超声波清洗器(昆山超声波仪器有限公司)；Sartorius 电子 分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司) 。 金丝桃苷(批号111521-200303， 中国 药品生物制品检定所)；宁心红杞胶囊样品由南京美福天然药物科技有限公司提供。 甲醇、乙腈(韩国SK chemicals 公司生产) 为色谱纯；磷酸（南京化学试剂有限公司生产）为分析纯；水为自制重蒸水。 　　2 方法与结果 　　2. 1 色谱条件Kromasil C18(4.6 mm× 250 mm，5 μm)色谱柱，Phenomenex fusion-Rp C18(4.0 mm×3.0 mm)保护柱，柱温30℃，流速1 ml/min；检测波长205 nm，乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱，洗脱程序(见表1)。在选定条件下，金丝桃苷和相邻组分色谱峰分离度大于1.5，按金丝桃苷峰 计算 ，理论塔板数在4 500以上，运行150 min，色谱图显示所有组分均在135 min内洗脱出柱。表1 流动相梯度变化程序（略） 　　2. 2 检测波长的选择本实验采用二极管阵列紫外检测器,在分析时进行全波长紫外扫描，并在不同波长下获取数据，经比较后表明205 nm色谱图出峰数目最多，峰形最好，基线平，各色谱峰相互之间分离度较好，故检测波长定为205 nm。 　　2. 3 溶液的制备 　　2. 3. 1 供试品溶液的制备精密称取宁心红杞胶囊内容物1 g，置10 ml容量瓶中，加甲醇适量，浸泡2 h，超声处理30 min，甲醇定容至刻度，摇匀，过滤，进样前取续滤液用0.45 μm 微孔滤膜过滤。 　　2. 3. 2 对照物溶液的制备精密称取金丝桃苷对照品10 mg置100 ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度摇匀得0.1 mg/ml的溶液作为对照物溶液，进样前0.45 μm 微孔滤膜过滤。 　　2. 4 指纹图谱测定的方法学考察 　　2. 4.1 空白及对照实验 吸取甲醇10 μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图。在选定条件下，空白溶剂(甲醇)对测定无干扰，见图1。　 吸取参照物溶液10 μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，见图2。 　　2. 4.2 精密度实验按“供试品溶液的制备”方法制备宁心红杞胶囊供试品溶液，连续进样5次，记录HPLC色谱图，结果各共有峰相对峰面积的RSD在0.31%～1.42 %，相对保留时间的RSD在0.06%～0.16%，表明仪器精密度良好。 　　2. 4. 3 稳定性实验按“供试品溶液的制备”方法制备宁心红杞胶囊供试品溶液，分别在0，2，4，8，12，24 h进样分析，记录HPLC色谱图，结果各共有峰相对峰面积的RSD在0.43%～1.87%，相对保留时间的RSD在0.13%～0.18%，表明样品在24 h内稳定性良好。 　　2. 4. 4 重复性实验取同一批样品按“供试品溶液的制备”方法平行操作，制备5份宁心红杞胶囊供试品溶液，记录HPLC色谱图，结果各共有峰相对峰面积的RSD在0.29%～1.68%，相对保留时间的RSD在0.08%