《分析化学教学课件》经典液相色谱法-2012.pptVIP

液相色谱法：以液体为流动相的色谱法称～。 二、液-固吸附色谱（liquid-solid adsorption chromatography） （一）分离原理 （二）常用吸附剂 （三）吸附剂和流动相的选择 （一）分离原理(separation mechanism) 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂表面的活性吸附中心对不同组分的 吸附能力差异而实现分离 （二）常用吸附剂(absorbent)：多孔、微粒状物质,吸附能力与吸附中心的多少及氢键形成能力的大小有关 1. 硅胶 2. 氧化铝 3. 聚酰胺 1. 硅胶（SiO2·H2O, silica gel） 结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构 表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心 特性： 1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性↑，吸附能力↑→强极性吸附中心，不易洗脱 吸附活性次序：活泼型束缚型游离型 2）吸水→失活 →105～110OC烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大 →500OC烘干(不可逆失水)→活性丧失，无吸附力 续前 2. 氧化铝 碱性氧化铝 pH 9～10 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4～5 适于分析酸性、中性物质 3. 聚酰胺 氢键作用 氢键能力↑强，组分越后出柱 （三）吸附剂和流动相的选择： 依据被测组分、吸附剂和流动相的性质 1. 被测组分性质（极性大小）： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂 弱极性物质——选择强吸附剂 3. 流动相的极性： 流动相极性↑大，对被测组分的洗脱能力↑大 “相似相溶”原则 ：根据组分性质、吸附剂的活性，选择适当极性的流动相 续前 4. 三者关系图示： 组分 吸附剂 流动相 极性 活性小 极性 非(弱)极性 活性大 非极性或弱极性 三、离子交换色谱 Ion-Exchange Chromatography * * 经典液相色谱法 分析化学(下 第三版) 一、概述 二、液固色谱法 三、离子交换色谱法 主要内容 经典液相色谱：固定相颗粒较大且不均匀 classic liquid C 常压下输送流动相 柱效较低 分析周期长 现代液相色谱：固定相颗粒小且均匀 Contemporary 高压下输送流动相 liquid C 柱效较高 分析周期短 一、概述 适用：分析酸性或中性物质 固定相(solid phase)：阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂； 流动相(mobile phase)：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液； 基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长； 阳离子交换：R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H + 阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH- 应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。 ＳＯ３－ ＳＯ３－ ＳＯ３－ ＳＯ３－ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ Ｎ＋Ｒ３ 阴离子交换树脂 (乳胶型） ５μm ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋ ＋