小叶榕叶水提物浸膏的HPLC指纹图谱初步研究.docVIP

　　小叶榕叶水提物浸膏的HPLC指纹图谱初步研究 作者：赖毅勤,刘峰,周宏兵,陈加林 【摘要】 目的 研究 小叶榕叶水提物浸膏的HPLC指纹图谱。 方法 色谱柱为大连依立特ODS C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）；以90%甲醇-水-0.2%H3PO4为流动相A，以20%四氢呋喃-水-0.2%H3PO4为流动相B，按一定比例配制，梯度洗脱；柱温为31 ℃；流速为1 mL/min；检测波长为275.5 nm； 分析 时间为120 min。结果 初步建立了小叶榕叶水提物浸膏的HPLC指纹图谱，标定了19个共有指纹峰，并对7个共有指纹峰进行了标记。结论 该法建立的指纹图谱具有可靠性，可为进一步研究小叶榕叶水提物的质量标准提供依据。 【关键词】 小叶榕叶;指纹图谱；高效液相色谱法 　　Abstract:Objective To determine the HPLC fingerprints of the aqueous extracts of Folium fici microcarpae.Methods The extracts n (4.6 mm×250 mm,5 μｍ) using 90% methanol-L/min and column temperature 31 ℃. The detection . Results HPLC fingerprints of the aqueous extracts of Folium fici microcarpae on peaks have been identified and 7 pounds leaves could be found the relative peaks in chart.Conclusion The fingerprints are reliable, fici microcarpae.. 　　Key fici microcarpae ; fingerprints；HPLC 　　小叶榕叶是桑科植物榕属小叶榕Ficus microcarpa L.f.的干燥叶子，主要产于广东和广西［1］。小叶榕叶水提物浸膏作为咳特灵的主成分收载在部颁标准［2］中，用于 治疗 哮喘和慢性支气管炎。 目前 的部颁标准，只对小叶榕叶水提物浸膏做了薄层鉴别，质量标准较简单。本文对小叶榕叶水提物浸膏进行了HPLC指纹图谱的研究，为进一步研究和制订小叶榕叶及其提取物HPLC指纹图谱奠定实验依据。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器 　　 　　福立2000高效液相色谱仪:N2000色谱工作站，二元泵，柱温箱，紫外检测器。 　　1.2 试剂 　　试剂均为色谱纯，并用0.45 μm微孔滤膜过滤。 　　1.3 对照品 　　 　　苯甲酸、1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-乙酮、2-羟基苯甲酸、4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、红花菜豆酸、4-甲氧基-3,5-二羟基苯甲酸，均为作者从小叶榕叶水提物中分离得到的化合物，并经IR、Ei-MS、NMR鉴定结构，纯度经HPLC检测大于98.5%。 　　1.4 药材 　　小叶榕叶水提物浸膏，白云山制药厂提供。 　　2 方法与结果 　　2.1 供试品溶液的制备 　　 　　取小叶榕叶水提物浸膏约1 g，蒸馏水溶解后，乙醇醇沉使溶液醇浓度为50%［3］，滤除不溶物，挥除乙醇直至没有醇味，得滤液。滤液用石油醚萃取3次，再用乙酸乙酯萃取3次［2］，得乙酸乙酯层浸膏。将乙酸乙酯层浸膏用适量的甲醇溶解，定容至10 mL，用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　 　　取各对照品适量，甲醇溶解后，定容至1 mL，用0.45 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。 　　2.3 检测波长的选择 　　取按“2.1”项方法制备的供试液进行紫外扫描，所得图谱见图1。从图1可见，275.5 nm处有最大吸收峰，故确定275.5 nm为检测波长。 　　图1 小叶榕叶供试液的紫外扫描图（略） 　　Fig.1 UV chromatogram of the aqueous extract of Folium fici microcarpae 　　2.4 色谱条件 　　色谱柱为大连依立特ODS C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）； 流动相：以90%甲醇-水-0.2%H3PO4为流动相A，以20%四氢呋喃-水-0.2%H3PO4为流动相B，按表1比例配制进行梯度洗脱；柱温为31 ℃；流速为1 mL/min；检测波长为275.5 nm；分析时间为120 min；进样量为20 μL。 　　表1 梯度洗脱表（略） 　　Tab.1 Gradient elut