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第10章核酸的生物合成〔ok〕

第十章 核酸的生物合成 遗传信息传递的 中心法则 目 录 第一节 DNA的生物合成 一、DNA的半保留复制 DNA的半保留复制的概念 原核生物DNA聚合反应有关的酶类 复制的忠实性 DNA的半保留复制实验依据 连接酶连接切口 大肠杆菌复制起点成串排列的重复序列 DNA复制的方式 原核细胞DNA的半不连续复制复制过程 DNA聚合酶Ⅲ全酶 DNA聚合酶催化的链延长反应 大肠杆菌三种DNA聚合酶比较 DNA聚合酶的3?- 5? 外切酶水解位点 真核细胞DNA复制的特点 端粒酶(telomerase) 端粒合成的一种模型 真核和原核DNA细胞复制比较 二、逆 转 录 作 用 逆转录过程中cDNA的合成 逆逆转录病毒的生活周期 生活周期 三、DNA的突变 DNA突变的类型 四、DNA的损伤与修复 DNA紫外线损伤的光裂合酶修复 DNA的损伤和切除修复 DNA的重组修复 SOS反应的机制 第二节 RNA的生物合成 一、DNA指导下RNA的合成(转录) 转录的概念和DNA的有义链和反义链 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 RNA聚合酶催化的反应 RNA合成过程 RNA链的延伸图解 原核生物中rRNA前体的加工 tRNA前体分子的加工 真核细胞mRNA的加工 真核生物和原核生物转录的差别 噬菌体Q?的合成 第三节 核酸合成的抑制剂 第四节 基因工程及分子生物学 技术简介 一、基因工程简介 基因工程的操作技术 大白鼠的生长激素基因插入到一个质粒中去,在金属巯基蛋白启动子旁边,这个启动子被金属镉所活化 三、PCR技术原理示意图 DNA和RNA合成的比较 基因工程的应用和前景 克隆羊多利的诞生 问答题 靶基因表达 lexA靶基因表达 但产物被分解 recA大量表达 RecA促使分解LexA 未诱导的细胞 诱导的细胞 靶基因 lexA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 recA基因被LexA 蛋白质部分阻遏 (?40个不同的位点被阻遏) LexA(阻遏物) RecA(辅蛋白酶) 单链DNA ATP 一、DNA指导下RNA的合成(转录) 二、 RNA指导下RNA的合成(RNA的复制) 三、RNA和DNA合成比较 1、概念及DNA的有义链和反义链 2、RNA聚合酶及催化反应 3、RNA合成过程 4、RNA转录后的加工 5、真核生物的RNA合成 转录是在 DNA的指导下的RNA聚合酶的催化下,按照硷基配对的原则,以四种核苷酸为原料合成一条与模板DNA互补的RNA 的过程。RNA的转录从DNA模板的特定位点开始,并在一定的位点终止。此转录区域为一个转录单位。 启动子(promoter) 终止子(terminator) 模板链(templatte strand) 反意义链(antisense strand) 有意义链(sense strand) 非信息区 DNA 5′ 5′ 3′ 3′ ? ? ? ? ?? 核心酶(α2ββ?) 起始因子 β?——和模板DNA结合 β——起始和催化聚合反应 α——? 全酶(αββ? ?) A C G A C G U U 模板DNA 5′ 3′ 5′ 3′ 新合成RNA 起始 双链DNA局部解开 磷酸二酯键形成 终止阶段 解链区到达基因终点 延长阶段 5? 3? ? ? RNA 启动子(promoter) 终止子(terminator) 5? ? RNA聚合酶 ? 5? ? 3? 5? ? 3? 5? 5? 3? ? 离开 3′ 3′ RNA-DNA杂交螺旋 聚合酶的移动方向 新生RNA 复链 解链 有义链 模板链(反义链) 延长部位 甲基化作用 专一核酸内切酶 30S前体 17S tRNA 25S 专一核酸外切酶 16S rRNA tRNA 23S rRNA 5S rRNA 专一核酸外切酶 a、切除tRNA前体两端多余的序列: 5’—端切除几到10个核苷酸。 b、末端添加:3’-端添加CCA序列。 c、修饰:形成稀有碱基如DH2 。 RNAaseP RNAaseF RNAaseP RNAaseF RNAaseD RNAaseD ACC ? ? ? 表示核酸内切酶的作用 表示核苷酸转移酶的作用 表示核酸外切酶的作用 表示异构化酶的作用 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子(cistron ) m7G-5′ppp-N-3

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