第九章_吸光光度法精要.ppt

* * * * 9.2 显色反应及其影响因素?一、显色反应 选用适当的试剂将待测离子转化为有色物质的反应，称之“显色反应”，所用试剂称之“显色剂”。 如： 被测离子 显色剂 有色物 络合反应 螯合反应  氧化还原反应 二、显色反应的选择性（符合的条件） （1）灵敏度高、选择性好 （ε104）；（2）有色络合物组成恒定，符合一定的化学式；（3）有色络合物性质稳定；（4）有色络合物与显色剂间颜色差别足够大（即显色剂在测定波长处无明显吸收，两种有色物最大吸收波长之差：“对比度”，要求△? 60nm）；（5）显色反应条件易于控制（以保证测定结果良好的重现性）。 三、显色条件的选择P3211、溶液酸度2、显色剂用量3、显色反应的温度4、显色反应时间5、溶剂6、共存离子的影响 9.3 吸光光度分析及误差控制 1、测量波长的选择和标准曲线制作 1）测量波长的选择 “最大吸收原则”；当有干扰时：“吸收最大，干扰最小”。 2）标准曲线的制作 在确定的测定波长和实验条件下，测定一系列含量不同的标准溶液的吸光度，A-C 实际工作中常出现标准曲线不成直线（发生弯曲）的现象，特别是溶剂液浓度较高时（＞0.01mol/L），常发生向C轴的弯曲(负偏离)；有时会发生向A轴弯曲（正偏离），此现象称之对朗伯－比尔定律的偏离。 2、对朗伯－比尔定律的偏离 1) 非单色光的影响 Beer定律应用的重要前提——入射光为单色光 结论： 选择较纯单色光（Δλ↓，单色性↑） 选λmax作为测定波长（Δ?↓，S↑且成线性） 2）介质不均匀引起的偏离 朗伯－比耳定律要求吸光物质的溶液是均匀的。 如果溶液不均匀，例如产生胶体、乳浊液或悬浊液，当λ射光通过不均匀溶液时，除了被吸光物质所吸收，还将有部分光强因散射等而损失，使透光率减小，即吸光度增大，导致工作曲线向吸光度轴弯曲偏离。 假设入射光强为Ｉ。吸收光强为Ｉa，透射光强为Ｉ， 损失的散射光强为Ir，则Ｉo=Ia + Ir + I 实际测得的透光率　　 　　如果没有发生散射，Ir=0，Ia不变，则理想的透光率　　 可见Ｔ实＜Ｔ理，或Ａ实＞Ａ理 故在光度法中应避免溶液产生胶体或混浊 3）溶液本身的化学反应引起的偏离 朗伯-比耳定律除要求吸收粒子是独立的，彼此之间无相互作用，因此稀溶液能很好地服从该定律。 在高浓度时(通常＞0.01 mol·L－1)由于吸收组分粒子间的平均距离减小，粒子间的相互作用增强，可使它们的吸光能力发生改变。吸光度与浓度间的关系就偏离线性关系，浓度越大，相互作用越强，偏离就越大。 溶液中的吸光物质常因条件变化而形成新的化合物或改变吸光物质的浓度，如吸光组分的缔合、离解，互变异构，配合物的逐级形成，以及与溶剂的相互作用等，都将导致偏离比耳定律。因此必须根据吸光物质的性质，严格控制显色反应条件，以期获得较好的测定结果。 3、吸光光度测量的误差 透光率的读数误差。光度计的读数标尺上透射比T的刻度是均匀的，故透射比的读数误差ΔT（绝对误差）与T本身的大小无关，对于一台给定仪器它基本上是常数，一般在ΔT＝±0.01。 吸光度的读数误差与A值有关 A=0.434或T=0.368时，相对误差最小。 说明：①当T=0.368（36.8%）或A=0.434时，Er最小（最小）；②当T很大或很小时，Er较大，当T→0或T→100时，Er→∞（即→∞）；③当T=15%～65%（A=0.2～0.8）时，Er较小——适宜的读数范围；④虽当T=36.8%时Er最小，但仍有2.72%，这说明光度法的测量误差至少有2%左右。 一、单组分的测定 1.一般方法: A-c标准曲线法 10.4 光度分析法的应用 试剂空白 X I0 I0 I0 0 100%参比 0%参比 1）选择测定波长 2）选择参比 3）工作曲线 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。--示差法 参比溶液的选择 试液、试剂及显色剂均无色时——蒸馏水参比； 试液有色而其他试剂及显色剂均无色时——不加显色剂的试样作参比（试样空白）； 显色剂有色而其他试剂及试液