原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
人促红细胞生成素基因和AcGFP1共表达真核表达载体的构建.pdf
维普资讯
农业生物技术学报 JournalofAgriculturalBiotechnology 2007，15 (4)： 717-718
· 研究简报 ·
人促红细胞生成素基因和AcGFP1共表达真核表达载体的构建 木
陈阿琴 ，·黄光菊 ，王争光 ，俞颂东 ，徐雪明
(1．浙江大学动物科学学院饲料研究所，杭州 310029；2．浙江宁波新波生物技术有限公司，宁波 315000)
关键词：促红细胞生成素基因；plRES2一AcG~TI；CHO；山羊成纤维细胞
中图分类号：S188 文献标识码：A 文章编号：1006—1304(2007)04—0717—02
ConstructionofEukaryoticExpressionVectortoCo—express
HumanErythropoietinGeneandAcGFP1
CHENA—qin，HUANGGuang-ju’，WANGZheng-guang，YUSong—dong ，XUXue—mingz
fJ．FeedScienceInstitute,CollegeofAnimalScience，ZhejiangUniversity,Hangzhou310o29,China；
2．ZhejiangXinboBiotectmologyCo．Ltd．，Ningbo315000，China)
哆 ：humanerythropoietingene；plRES2一AcG~TI；CHO；goatfibroblast
人促红细胞生成素(humanerythropoietin，hEPO)是一种 3EP：5-CG 1A：! TCATCTGTCCCCTGTCCTGCAGG一3
由肾脏分泌的酸性糖蛋白激素。它是一种红细胞造血刺激因 BamI-II
子，在医学临床，主要用于治疗肾性贫血，对其它各种疾病和 B．人工合成外显 1的编码序列：
化疗引起的贫血也有疗效。AcGFP1来源于coemlescens水母 5El：5-l’：!垒 垒l：!：垒rI ATGGGGGTGCACGG。3’，
fAequoreacoemlescens)，是单节显性增强型 GFP(EGFP)的一 XhoI
种新型替代物，在氨基酸水平上跟EGFP有 94％的同源性。 3El：51．巡 CGTGCACCCCCATCCATAATC一3’。
本研究将hEPO插入plRES2．AcGFP1真核表达载体中，并通 EcoRI
过报告基因AcGFP1的表达鉴定 hEPO是否在 CHO(中国仓 ATTATGG为Kozak序列。
鼠卵巢细胞)及山羊成纤维细胞中转染及表达 ，从而建立一 1．3 phEPO．IRES．AcGFP1荧光真核表达载体的构建
种简单的筛选方式。 人血液基因组DNA的提取、酶切、连接和重组质粒转化
大肠杆菌的方法参照文献 (SambrookandRussell，2002)；质
1 材料和方法
粒提取 、DNA片段回收和纯化采用上海生工试剂盒。
1，1 材料 1，4 hEPO重组质粒转染 CHO细胞和山羊成纤维细胞
文档评论（0）