重组截短型ELR1蛋白在昆虫表达系统中的分泌表达与结晶.pdf

第33 卷 第6 期 中 国 预 防 兽 医 学 报 Vol. 33 ，No.6 2011 年 6 月 Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine Jun. 2011 doi: 10.3969/j.issn.1008-0589.2011.06.04 重组截短型ELR1 蛋白在昆虫表达系统中的 分泌表达与结晶 1,2# 2# 1 3 2* 2* 孙佩龙 ，郝飞飞 ，吕淑霞 ，刘新奇 ，周建华 ，林跃智 (1. 沈阳农业大学生物科学技术学院，辽宁沈阳 110161；2. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/ 大动物病研究室，黑龙江哈尔滨 150001；3. 南开大学生命科学学院，天津 300071) 摘 要：为获得马传染性贫血病毒单一受体(ELR1) 的结晶体，本研究通过PCR 方法获得ELR1 胞外区基因 片段，利用基因重组技术构建包含ELR1 胞外区基因的重组杆状病毒表达质粒(Bacmid-ELR1) 。将其转染至昆虫 细胞sf9 中进行蛋白表达，western blot 检测结果显示ELR1 胞外区截短型重组蛋白在昆虫表达系统中获得表达。 目的蛋白经亲和层析和凝胶过滤方法纯后化，通过多组结晶条件筛选获得了ELR1 胞外区重组蛋白结晶体。本研 究为ELR1 立体结构和功能的解析提供了重要基础。 关键词：马传染性贫血病毒单一受体；昆虫表达系统；纯化；结晶 中图分类号：S852.65 文献标识码：A 文章编号：1008-0589(2011)06-0427-04 The expression and crystallization of out-membrane region of equine lentiviral receptor 1 1,2# 2# 1 3 2* 2* SUN Pei-long , HAO Fei-fei , LV Shu-xia , LIU Xin-qi , ZHOU Jian-hua , LIN yue-zhi (1. College of Biotechnology, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161, China; 2. State Key Laboratory of Veterinary Biotechnology, Harbin Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Harbin 150001, China; 3. Nankai University, Tianjin 300071, China) Abstract : The receptor for equine infectious anemia virus (EIAV) was identified as equine lentiviral receptor 1 (ELR1) and classified as a member of the tumor necrosis factor receptor (TNFR) family according to its sequ