纳米分辨相干反斯托克斯拉曼散射显微成像.pdfVIP

物理学报 Acta Phys. Sin. Vol. 64, No. 22 (2015) 223301 纳米分辨相干反斯托克斯拉曼散射显微成像 张赛文 陈丹妮 刘双龙 刘伟 牛憨笨 (光电子器件与系统 (教育部/广东省) 重点实验室, 深圳大学光电工程学院, 深圳生物医学工程重点实验室, 深圳 518060) ( 2015 年5 月15 日收到; 2015 年8 月1 日收到修改稿) 采用附加探测光声子耗尽法来实现超衍射极限相干反斯托克斯拉曼散射显微成像. 此方法引入一束环形 分布的附加探测光来消耗点扩展函数周边的相干声子, 实现点扩展函数的改造, 从而达到超越衍射极限的空 间分辨率. 为了获得更高的空间分辨率和更佳的相位匹配条件, 通常需采用高数值孔径物镜对抽运光、斯托克 斯光和探测光进行聚焦, 此时标量衍射理论不再成立. 基于矢量衍射理论, 分析了线偏振光、圆偏振光先后经 过螺旋相位片和高数值孔径物镜后的光强分布, 结果表明: 圆偏振光在高数值孔径物镜后焦平面的光强分布 呈中心对称状, 较线偏振环形光更适合作为附加探测光. 此外, 采用全量子理论分析了附加探测光声子耗尽 法. 结果表明: 当附加探测光与探测光强度比为80 时, 成像系统的横向空间分辨率可以达到45 nm; 继续提高 附加探测光强度, 空间分辨将进一步提高. 关键词: 圆偏振光, 纳米分辨率, 相干反斯托克斯拉曼散射, 矢量分析 PACS: 33.20.Fb, 42.65.Dr, 78.47.jh, 42.65.–k DOI: 10.7498/aps.64.223301 56 点扩展函数减小 ; 第二种是在点扩展函数周边 1 引 言 引入局域振荡场, 通过干涉的方法使点扩展函数减 7 小从而提高空间分辨率 ; 第三种是采用结构光照 相干反斯托克斯拉曼散射(coherent anti- 明来提高空间分辨率, 但需要指出的是, 虽然它在 Stocks Raman scattering, CARS) 是一种基于分 8 实验上获得了约120 nm 的横向空间分辨率 , 但 子固有振动、转动谱的非线性光学成像方法, 因此 空间分辨率大于100 nm, 因此不属于真正意义上 具有良好的化学特异性以及高灵敏度和三维层析 的纳米分辨成像方法. 此外, 上述三种方法都是基 12 能力 , 广泛应用于生物学领域中对蛋白质、核酸 于分子某一振动频率的超分辨成像方法, 因此不能 和脂类分子的成像34 . CARS 显微技术基于三阶 准确地识别分子. 非线性效应, 其空间分辨率较普通光学显微虽然有 我们提出一种基于分子宽带振动谱的时间分 所改善, 但是仍然受到光学衍射极限的限制. 辨CARS 的超分辨方法, 称为附加探测光声子耗尽 目前国际上已经提出了实现CARS 超分辨的 (additional probe beam induced phonon depletion, 若干方法, 但主要还是停留在理论阶段, 尚未有分 APIPD) 910 . 该方法的原理是: 当抽运光、斯托克 辨率小于100 nm 的成像实验. 这些理论方法大致 斯光与物