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- 2017-05-10 发布于湖北
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生科大实验
生科大实验
酵母蔗糖酶的提取纯化与鉴定
班别:生物科学201102班
组员:陈渭鸿 陈景富
学号:
实验时间:
实验指导老师:
开题报告:酵母蔗糖酶的提取纯化与鉴定
一.实验目的:
蔗糖酶(E.C.3.2.1.26)((—D—呋喃果糖苷果糖水解酶),能催化非还原性双糖(蔗糖)的1,2-糖苷键裂解,释放出等量的果糖和葡萄糖。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,也能催化棉子糖水解,生成密二糖和果糖。
由于果糖甜度高 ,约为蔗1.36~1.60倍 ,在工业上具有较高的经济价,增加甜味,制造人造蜂蜜,,制造含果糖和巧克,还可为果葡糖浆的工业化生产提供新,其活力占蔗糖酶活力的大部分,是含有50% 糖成分的糖蛋白。在细胞膜内侧细胞质中的称之为内蔗糖酶,含有少量的糖。两种酶的蛋白质部分均为双亚基,二聚体,两种形式的酶的氨基酸组成不同,外酶每个亚基比内酶多两个氨基酸,Ser和Met,它们的分子量也不同,外酶约为27万(或22万,与酵母的来源有关),内酶约为13.5万。尽管这两种酶在组成上有较大的差别,但其底物专一性和动力学性质仍十分相似,因此,本实验未区分内酶与外酶,而且由于内酶含量很少,极难提取,本实验提取纯化的主要是外酶。
每摩尔蔗糖水解产生两摩尔还原糖,蔗糖的裂解速率可以通过NeLson法测定还原糖的产生数量来测定。一个酶活力单位规定为在标准分析条件下每分钟催化底物转化的数量。
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