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- 2017-05-10 发布于湖北
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第二章_沉淀法
第二章 沉淀法
沉淀法(即溶解度法 )它是古老、实用、
简单的初步分离的方法,该法成本低、操作简
单,不仅用于实验室中,也用于某些生产目的
的制备过程,是分离纯化生物大分子,特别是
制备蛋白质和酶时最常用的方法。通过沉淀,
将目的生物大分子转入固相沉淀或留在液相,
而与杂质得到初步的分离。
目的与要求
何谓盐析?其原理是什么?
盐析法纯化蛋白质的优点有哪些?
盐析的一般操作步骤是什么?影响盐析
的主要因素有哪些?
有机溶剂沉淀法的原理是什么?
第一节 基本原理与沉淀类型
一、基本原理
沉淀法也称溶解度法。其纯化生命大分子物质的
基本原理是,根据各种物质的结构差异 (如蛋白质分
子表面疏水基团与亲水基团之间比例的差异)来改变
溶液的某些性质(如pH、极性、离子强度、金属离子
等),就能使抽提液中的有效成分的溶解度发生变化。
因此,选择适当的溶液就能使欲分离的有效成分呈现
最大溶解度,而使杂质呈现最小溶解度,或者相反,
有效成分呈现最小溶解度,而杂质呈现最大溶解度。
二、制备蛋白质
影响蛋白质溶解度的外界因素:
溶液的pH
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