益智仁盐炙前后指纹图谱对比研究.docVIP

　　益智仁盐炙前后指纹图谱对比研究 作者：李文兵，胡昌江，李兴华，黄勤挽，谢锋，谢秀琼 【摘要】 　　目的建立益智仁盐炙前后高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，探讨盐炙对益智仁内在成分的影响。方法对益智仁生品、盐炙品饮片进行HPLC/UV指纹图谱分析，色谱柱采用Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈和水梯度洗脱，检测波长为260 nm，柱温：35℃，流速：1.0 ml/min。结果益智仁盐炙后有两个新的色谱峰出现,7个特征峰相对含量发生变化。结论益智仁通过盐炙后化学成分既有量的变化，也有质的变化。 【关键词】 益智仁　盐炙　高效液相色谱法　 指纹图谱 　 　　Abstract：ObjectiveTo establish HPLC fingerprints of Fructus Alpiniae Oxyphyllae betpact on the internal ponents of Fructus Alpiniae Oxyphyllae after salt processing.MethodsAnalyze the HPLC/UV fingerprints of Fructus Alpiniae Oxyphyllae betatographic column of Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm，5 μm) eluted by acetonitrile and hydraulic gradient. The detection , the column temperature l/min .ResultsTatographic peaks existed and the contents of seven characteristic peaks changed after salt processing of Fructus Alpiniae Oxyphyllae. ConclusionThe change of chemical position in Fructus Alpiniae Oxyphyllaes betg，德国Sartorius公司）；SZ-93自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）。 圆柚酮对照品由美国Sigma公司提供(批号纯度gt;98%)，乙腈（色谱纯，美国Fisher公司），水（重蒸水），为色谱流动相；甲醇为分析纯。益智仁药材产地为海南琼中，经本校生药教研室卢先明教授鉴定确认为姜科植物益智Alpinia oxyphylla Miq.的干燥成熟果实,盐炙益智仁按筛选出的最佳工艺条件制得［1］。 　 　2 方法与结果 　　2.1 参照溶液的制备精密称取圆柚酮对照品适量，用甲醇稀释制成每毫升含圆柚酮0.02 mg对照品溶液。 　　2.2 供试品溶液的制备取生、盐益智仁粉末（过40目筛）约1 g，精密称定,加甲醇20 ml索氏提取2 h，提取液转移置25 ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.3 益智仁HPLC指纹图谱的建立 　　2.3.1 色谱条件及系统适用性试验色谱柱：Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：A：水，B：乙腈，流动相比例见表1；检测波长：260 nm；记录时间：85 min；柱温：35℃；流速：1.0 ml/min。表1 流动相比例（略） 　　2.3.2 样品测定取供试品溶液各20 μl 注入液相色谱仪, 按“2.3.1”项下色谱条件测定, 记录色谱图。在供试品色谱中, 以圆柚酮色谱峰的保留时间和色谱峰面积为1, 计算 各指纹峰的相对保留时间和相对共有峰面积值。 　　2.4 方法学考察 　　2.4.1 仪器精密度实验取生益智仁粉末，精密称定,按“2.2”项下制备供试液，连续进样6次，考察仪器的精密度。结果表明,各主要色谱峰相对保留时间和相对峰面积比值无明显变化, RSD分别为0.08%～0.99%和0.36%～1.43%，表明仪器精密度良好。 　　2.4.2 稳定性实验取生益智仁粉末，精密称定,按“2.2”项下制备供试液，分别在0，2，4，8，12和24 h进样，记录色谱图。结果表明,各主要色谱峰相对保留时间和相对峰面积比值无明显变化,RSD分别为0.10%～1.02%和0.24%～1.25%，表明样品24 h内稳定性良好。 　　2.4.3 重复性实验取生益智仁粉末5份，精密称定,按“2.2”项下制备供试液，记录指纹图谱。结果表明,各主要色谱峰相对保留时间和相对峰面积比值无明显变化,RSD分别为0.06%～1.23%和1.02%～1.54%，表明重复性良好。 　　2.5 生益智仁指纹图谱共有模式的建立取10批生益智仁粉末，按“2