抗PIWIL2蛋白多克隆抗体的制备、鉴定及初步应用.pdfVIP

第二军医大学学报 2008 年 9 月第 29 卷第 9 期 的tp:!/WWW. ajsmmu. cn • 1034 • Academic Journal of Second Military Medical University.Sep. 2008. Vo l. 29. No. 9 rxJI ,10.3724/SP.J. 1008. 2008.01034 ·伦著· 抗 PIWIL2 蛋白多克隆抗体的制备、鉴定及初步应用 朱风尚1 ，黄志刚1. 胡 莺2 ，张小燕2 ，陈锡美1 ，孟逊2 ，都恒骏1.2 * 1.同济大学附属同济医院消化内科，上海 200065 2. 生物芯片上海国家工程研究中心，上海 201203 [摘要] 崎筒:制备兔抗人 PIWIL2 (P-element-induced wimpy testis like 2 ，或称 HIWI2) 的多克隆抗体，并鉴定其特异性，初 步探讨其在人正常及肿瘤组织中的分布。方锋:人工合成特异性 PIWIL2 多肤，以马来就胶活化匙孔血蓝蛋白 (Keyhole lirn晒 pet hernocyanin ， KLH) 为载体构建多肤免疫原，致敏大白兔，制备兔抗人 PIWIL2 多克隆抗体。亲和层析法纯化抗体，ELlSA 和 Western 印迹鉴定特异性，人组织芯片行 PIWI口的免疫组化研究。结果:通过构建 PIWIL2 多肤-KLH 载体复合物致敏大 白兔，制备出兔抗人 PIWIL2 蛋白多克隆抗体。凹，ISA 及 Western 印迹证实兔抗人 PIWIL2 抗体可特异性识别 PIWIL2 多肤。 人组织芯片免疫组化染色显示，PIWIL2 在肿瘤细胞的表达具有组织特异性，大多数正常和癌组织的平滑肌细胞胞质中呈阳性 染色。结伦:成功制备出兔抗人 PIWIL2 多克隆抗体，为后续研究奠定了基础。 [关键词] PIWIL2 蛋白$多克隆抗体g 组织芯片 [中图分类号] R 349.83 [文献标志码] A [文章编号J 0258-879X( 2008) 09-1034-04 Preparation , identification and application of polyclonal antibodies against human PIWIL2 protein 1 1 Z Z 1 z 1 Z ZHU Feng-shang , HUANG Zhi-gang , HU Ying , ZHANG Xiao-yan ,CHEN Xi-mei , MENG Xun .GAO Heng-jun • * 1. Department of Gastroenterology. Tongji Hospital ,Tongji University ,Shanghai 200065. China 2. National Engineering Center For BioChip in Shanghai ,Shanghai 201203 [ABSTRACT] Objective ,To prepare rabbit polyclonal antibody against human P-element-induced wirnpy testis like 2 (HIWI2) protein.identify its properties and investigate its distribution in normal and tumor tissues by means of tissue chip. Methods , PIWIL2 peptide was synthesized chemically and conjug