结扎兔基底动脉后脑干缺血范围的研究.docVIP

　　结扎兔基底动脉后脑干缺血范围的研究 作者：张翠英 卢彦珍　范毅敏 王黎敏 尚改萍 【摘要】 　　目的：观察结扎兔基底动脉后脑干的缺血范围。 方法 ：在基底动脉起始部结扎制作脑干局部缺血动物模型， 应用 墨汁加明胶灌注并显示血管，光镜下 分析 延髓血管密度变化以确定缺血范围和程度，用尼氏染色观察神经元形态学变化。结果：结扎基底动脉后，脑干血管密度减少(P＜0.05)，范围为闩后0.2 mm～闩前10 mm，包括延髓上部和脑桥；尼氏染色显示缺血区一些神经元胞体肿胀，着色变浅，尼氏体减少，其灰度值明显高于对照组(P＜0.05)。结论：结扎基底动脉起始部可以引起延髓上部和脑桥的局灶性缺血性损伤。 【关键词】 基底动脉 脑干 缺血 兔 Abstract Objective：To observe ischemic coverage of brain stem after ligating basilar artery trunk in rabbits.Methods：Brainstem ischemic model ade by ligating the beginings of the basilar artery trunk, the blood vessels ia. The morphology of neurons in brainstem from 10 mm rostral to the obex to 0.2 mm posterior to the obex including pons and part of superior medulla.The soma e of neurons in the ischemic region of brainstem. Conclusion：ligating the basilar artery trunk might induce pons and part of superior medulla focal ischemic damage. Key ;Ischemia;Rabbit 临床上脑梗死多发于大脑动脉某一分支，尤其是大脑中动脉和椎基底动脉。脑干血供复杂,解剖部位较深,建立脑干缺血模型相对困难，因此 目前 这方面的 研究 主要集中在颈内动脉系统，而对椎基底动脉系统的研究较少。脑干中存在着维持生命活动的基本中枢，如呼吸中枢和心血管中枢等，脑干受损可直接威胁生命。我们前期的研究［１］表明结扎兔基底动脉主干后呼吸功能发生明显变化，为了进一步探讨这些功能改变的机制，本研究观察了结扎兔基底动脉主干后脑干的血供变化和神经元形态学改变。 1 材料和方法 1.1 实验动物分组与脑干缺血模型的制备 实验选用健康大耳白兔（太行制药厂动物中心提供）12只，体质量2.3 kg～2.6 kg，雌雄不限，随机分为手术对照组（5只）和实验组（7只）。动物用25%氨基甲酸乙酯（4 mL/kg）耳缘静脉注射麻醉，仰卧位固定，行气管插管，在气管插管上方分离气管和食管，双结扎，于两结扎点之间切断气管和食管；分离肌肉组织，于枕骨基底部正中开一约2.0 cm×1.5 cm的骨窗，打开硬脑膜，暴露基底动脉及其分支，小心分离血管。手术对照组不结扎血管，实验组于基底动脉起始处结扎血管，实验过程中动物直肠温度维持在(37±0.5) ℃。 1.2 动物的灌注、固定及组织学处理 动物在结扎血管后6 h经左心室做升主动脉插管，灌注40 ℃～５０ ℃色胶400 mL（4%多聚甲醛、20%墨汁、1%明胶、75% 0.1 mol/L磷酸缓冲液，pH=7.4）［２］。次日取脑干置于10%甲醛溶液中固定1 1850）恒冷箱内连续冠状切片，切片范围为闩后1 mm～闩前10 mm，片厚包括40 μm和7 μm两套，每连续切5张40 μm后切一张7 μm，40 μm的切片按顺序每5张取一张，用于观察血管密度和 计算 缺血范围，7 μm的切片按顺序全部取做尼氏染色以观察神经元形态学变化。 1.３ 缺血范围的判断 采用BI-2000图像分析系统（成都泰盟 科技 公司出品）中免疫组化分析软件分析血管分布密度，具体方法是在每张切片中选定互不重叠的四个测量区域，区域内墨汁黑染的血管用一定的灰度值选定作为目标，自动测量，软件将自动求出测量区域内的血管分布密度、区域面积等结果。采用同样的软件观察尼氏染色切片中神经元的形态学变化，自动测量选定区域内的平均灰度值，所测灰度值从0级到255级，黑色为0，白色为255级，灰度值与神经元尼氏体的量成反比关系，灰度值越大，尼氏体含量越少。用血管密度变化和神经元的形态学变化作为缺血的判定指标。 1.４ 统计学处理 同一组动物的脑干血管密度和神经元灰度值分别取平