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实验二DNA的细胞化学Feulgen反应
二、实验原理:DNA是由许多单核苷酸合成的多核苷酸,每个单核苷酸又由磷酸、脱氧核糖和碱基构成。DNA经1mol/L盐酸水解,其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开、使脱氧核糖的第一碳原子上形成游离的醛基,这些醛基与Schiff试剂反应。Schiff试剂是由碱性品红和偏重亚硫酸钠作用,形成无色的品红液,当无色品红与醛基结合则形成紫红色的化合物。因此凡有DNA的地方,都能显示紫红色。紫红色的产生,是由于反应有产物的分子内含有醌基,醌基是一个发色基团,所以具有颜色。材料不经过水解或预先用热的三氯醋酸或DNA酶处理,得到的反应是阴性的,从而证明了Feulgen反应的专一性。 三、实验仪器、材料和试剂 显微镜、染色缸、恒温水浴箱、载玻片、盖玻片、吸水纸。 实验材料:鲫鱼血。 四、实验步骤: 观察: 光镜10× * 实验二、DNA的细胞化学——Feulgen反应 一、实验目的:了解Feulgen反应的原理,掌握有关的操作方法。 鱼血涂片 Carnoy固定剂(10-30min) 95%酒精(10min) 70%酒精(10min) 蒸馏水洗 1N盐酸(室温1-2分钟) 1N盐酸(60度下,10min) Schiff试剂(30min) 亚硫酸水(换3次,每次5分钟) 蒸馏水 镜检 5%三氯醋酸 (90度下,15分钟) 对照组 蒸馏水 五、作业: 写出实验原理,操作结果及讨论分析。 *
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