维药雪莲前列栓的质量标准研究.docVIP

　　维药雪莲前列栓的质量标准研究 作者：希尔艾力·吐尔逊，斯拉甫·艾白，曼尔丹·尼牙孜，吐尔洪，薛梅 【摘要】 目的建立雪莲前列栓的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)鉴别处方中的雪莲，用高效液相色谱(HPLC)法测定雪莲前列栓中绿原酸的含量。使用ETTLER AE200型 电子 天平，Sartorius BP211D型电子天平，KT-1000l溶解，作为供试品溶液。另取雪莲对照药材1 g，加甲醇20 ml，超声提取30 min，水浴浓缩至1 ml，作为对照药材溶液;取芦丁、绿原酸对照品，甲醇溶解，分别制成每毫升含4 mg的溶液，作为对照品溶液。取不含雪莲的阴性样品3g,按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。照薄层色谱法[《中国药典》2005年版，Ⅰ部(附录VI B)]试验，吸取供试品溶液10μl，对照药材、对照品溶液5 μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶6∶1∶2)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%亚硝酸钠的1%的甲醇溶液，加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。阴性无干扰。结果见图1。 　　1.阴性对照 2～4.供试品(批号：040402，040405，040410) 　　5. 雪莲对照药材 6.芦丁对照品 7. 绿原酸对照品 　　图1 雪莲前列栓的TLC鉴别 　　2.2 含量测定 　　2.2.1 色谱条件色谱柱为m×4.6 mm，5μm) ，加保护柱;检测波长：327 nm;流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液(10∶90);流速：1.0 ml·min-1;柱温：35℃。理论塔板数按绿原酸峰 计算 应不低于1 000。流速为1.0 ml·min-1时，在此条件下，绿原酸保留时间、分离度、理论板数等色谱参数均符合要求。 　　2.2.2 对照品溶液的制备精密称取绿原酸对照品7.6 mg，置10 ml量瓶中，加70%甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得对照品储备液(0.76 mg·ml-1);精密量取对照品储备液1 ml置50 ml量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含绿原酸15.2μg)。 　　2.2.3 供试品溶液的制备取供试品10粒，碎断，取约2.2 g，精密称定，置索氏提取器中，加氯仿适量, 回流脱脂5 h以上，弃去氯仿溶液，滤渣连同滤纸挥尽氯仿;加入甲醇适量，回流提取至近无色，水浴蒸至近干，加70%甲醇定容至50ml量瓶中，摇匀，用微孔滤膜(0.45 μm)滤过，即得。 　　2.2.4 阴性对照溶液的制备按处方制备不含雪莲药材的供试品，依供试品溶液制备方法制成阴性供试品溶液。 　　2.2.5 线性关系考察精密量取对照品储备液1 ml置50 ml量瓶中，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得(每毫升含绿原酸15.2 μg)。制得标准品溶液，取2，6，10，14，18，22 μl进样。以绿原酸进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为：Y=2 646.3X-1 722.9，r=0.999 8，结果表明在26.68～293.48 μg范围内，绿原酸进样量与峰面积之间有良好的线性关系。 　　2.2.6 精密度实验精密吸取“2.2.2”项下的对照品溶液各连续进样5次，每次10 μl，测得绿原酸峰面积的RSD为0.87%，表明仪器精密度良好。同一批供试品(040402)制成供试品溶液，连续进样6次，10 μl/次, 测得绿原酸峰面积的RSD=0.67%，表明样品精密度良好。 　　A-对照品 B-样品 C-阴性样品 a-绿原酸 　　图2 高效液相色谱图 　　2.2.7 稳定性实验取同一供试品(批号：040402)按“2.2.3”项下方法制备供试液，分别于0，2，4，6，8，12 h进样10 μl，测定绿原酸的峰面积，结果绿原酸峰面积的RSD为0.86%，结果供试品溶液12 h内稳定。 　　2.2.8 重复性实验同一批样品(040402)分别制成5个供试品溶液，连续进样6次，10μl/次 ，进样测得绿原酸峰面积并 计算 含量，RSD为0.40%(n=6)。表明本方法重复性良好。 　　2.2.9 回收率实验精密称取供试品(040402)约1.1 g，共9份，精密称定，分别置索氏提取器中，分别加入绿原酸对照品溶液(1.002 mg·ml-1)267.5，335.7，401.3 μl，加氯仿180 ml，回流5 h以上，弃去氯仿溶液;滤渣连同滤纸挥尽氯仿，加入甲醇适量，回流提取至近无色，水浴蒸至近干，加甲醇定容至50 ml量瓶中，摇匀，进样10 μl，测定，平均回收率为97.86%(n=9),RSD为1.89% 。结果见表1。 　　2.2.10 样品含量测定取小试7批和中试3批样品(2.2 g/