罐疗提高盐酸川芎嗪透皮吸收的研究.docVIP

　　罐疗提高盐酸川芎嗪透皮吸收的研究 【摘要】 　　目的研究中医传统付罐疗法促进中药活性成分盐酸川芎嗪透皮吸收，优选最佳罐疗方法、条件。方法采用正交实验法，以中药活性成分盐酸川芎嗪24 h累积渗透量为测评指标，比较不同罐法、压力、罐疗时间对盐酸川芎嗪透皮吸收的影响。结果最佳罐疗条件为：刮罐、高压力、15 min。结论罐疗能显著地提高中药活性成分盐酸川芎嗪的透皮率，可以作为一种新的物理促进药物透皮渗透的方法。 【关键词】 罐疗 盐酸川芎嗪 透皮吸收 正交实验 　　研究发现，罐疗作用下皮部产生均匀散在的龟裂样裂缝，经 自然 型电镜观察测定，可穿透角质层，经原子示踪（In）测定，在内关穴处，可使透皮率提高3.8倍，为提高药物透皮率提供了一个物理方法:张力裂缝的方法。本项研究进一步证实了罐疗的此项作用，并结合中医传统罐法的留罐、颤罐、刮罐，在不同压力（低、中、高），不同罐疗时间（5，10，15 min）下，通过正交实验，优选出最优的罐疗提高中药活性成分盐酸川芎嗪透皮率的条件，进一步证实了罐疗可以作为一种新的物理促进药物透皮渗透的方法，为大幅提高靶向透皮药物的透皮率，提供一套新型的、实用的、可靠的方法。 　　 1 仪器与材料 　　1.1 仪器 　　TK-12B型透皮扩散试验仪（上海铠凯科技贸易有限公司）；2两种规格，每贴含盐酸川芎嗪150 mg)，氯化钠（成都金山化学试剂有限公司），甲醇（色谱纯,江苏汉邦科技有限公司），水为重蒸水。盐酸川芎嗪对照品（ 中国 药品生物制品检定所 批号：0817-9803），付罐：贵阳中医学院研制，可适于不同的罐疗法。 　　1.3 动物日本种大白兔，雌雄兼用，体重2.1～2.3 kg，由贵阳医学院动物房提供。 　　 2 方法与结果 　　2.1 罐疗方法［1］ 　　2.1.1 留罐调定罐内压力，至规定时间时去罐。 　　2.1.2 颤罐将付罐施于穴位处，用压力调节阀不断调节罐内压力，至规定时间去罐。 　　2.1.3 刮罐调定罐内压力，来回移动付罐，至规定时间去罐。 　　2.2 透皮给药 　 　　2.2.1 离体兔皮的制备先用剪刀剪去兔背部的毛，再用电动理发器除去兔背部的绒毛，处死，剥取背部皮肤，小心去除皮下脂肪等组织，然后置1/1 000苯扎溴铵（新洁尔灭）溶液中浸泡30 min防腐，取出后用生理盐水反复冲洗，直至洗液澄清为止，剪成适当的大小，最后置于密封袋中，加入适量的生理盐水，放入冰箱中（－20℃）冷冻保存（两周内用完）。 　　2.2.2 扩散装置及介质采用TK-12B型透皮扩散试验仪。扩散池接收室中央部直径为1.93 cm，面积2.92 cm2，接受室容积为6 ml；接受液为P=0.9% NaCl溶液。 　　2.2.3 透皮贴剂的体外透皮实验实验前从冰箱中取出备用皮肤隔日融冻(0～5℃ )，用生理盐水反复淋洗至洗液澄清，滤纸吸干，调定罐内压力，按不同罐法施于皮肤，至规定时间后去罐，将盐酸川芎嗪贴剂贴于该处兔皮上（留罐、颤罐后皮肤处贴8.76 cm2贴剂，刮罐后皮肤处贴17.52 cm2贴剂），接受室加满扩散介质，以37℃水浴保温，磁力搅拌子以200 r/min的速度搅拌，间隔一定时间（1, 2, 4, 6, 8. 12, 16，24 h）取出接收室中全部接收液，立即补加等量的新鲜扩散介质。接收液以0.45 μm的微孔滤膜过滤，弃去初滤液，收集续滤液1 ml（必要时可将1 ml续滤液用生理盐水稀释至10 ml），进样测定。按下列公式 计算 单位面积累积渗透量： 　　Q= Cn×V/A Cn= C1十C2十……+Cj 　　式中Q为单位面积累积渗透量（单位：mg/cm2），A为接收池面积（单位：cm2），V为接收室体积(单位：ml)，j=1, 2, 4, 6, 8, 10, 12, 16, 24h 　　再按列公式计算不同罐疗方法后盐酸川芎嗪贴剂24h累积渗透量（mg）： 　　累积渗透量=Q×A 　　式中Q同上，A为盐酸川芎嗪贴剂面积（cm2）。 　　2.3 正交实验设计采用L9（34）交表进行实验，以盐酸川芎嗪24 h累积渗透量为测评指标，考察罐法、压力、罐疗时间3个因素对盐酸川芎嗪透皮吸收的影响。因素水平详见表1。表1 正交设计因素与水平（略） 　　由于不同的罐疗方法所对应的压力含义不同，所以 参考 　　2.4 含量测定 　　2.4.1 色谱条件色谱柱为美国Dikma DiamonsilTM C18 （5 μm, 250 mm×4.6 mm）；流动相为甲醇：水（50：50，V/V）；检测波长282 nm；流速1.0 ml/min；柱温30℃；灵敏度2AUFS；进样量：5 μl。在此分离条件下，分离良好。 　　2.4.2 标准曲线的绘制取盐酸川芎嗪对照品9.08 mg置100 m