蛋白质含量的测定30872.pptVIP

蛋白质含量的测定 掌握蛋白质含量测定的原理和方法 学会标准曲线的绘制 熟练使用分光光度计 测定蛋白质含量的方法 测定蛋白质含量的方法较多 基本上都是根据蛋白质的理化性质和生物学活性建立起来的。 二、比色法：利用蛋白质与不同试剂的呈色反应，测定蛋白质的含量，如双缩尿法和酚试剂法（lowry’s method）。 三、紫外分光光度法：利用蛋白质对280nm紫外光有最大的吸光度而采用 蛋白质与酚试剂呈色深浅与蛋白质的含量成正比，利用蛋白质的浓度与呈色的关系，制备标准曲线，来测定样品中的蛋白质含量。 用已知浓度的标准牛血清白蛋白溶液（浓度为50mg%）配成一系列不同浓度的蛋白质溶液。 取七支试管，编号，按下表操作 标准曲线的绘制 以蛋白质的含量（μg）为横坐标，光密度值（OD）为纵坐标，绘制出蛋白质含量的标准曲线。 根据样品中的OD650, 从蛋白质标准曲线中找到样品中蛋白质的μg数。 计 算 每100ml血清中所含蛋白质的克数为： g%=样品中蛋白质含量（μg数） ×1/0.5×100×10-6×500 注 意 事 项 测定蛋白质的浓度最好在25~100μg之间，故血清稀释倍数一般为200~500。 各管加酚试剂应快，必须立即混匀，否则就会出现浑浊。　　 2、绘制出标准曲线：要求规范作图