血清谷丙转氨酶活性的测定(论文资料).pptVIP

赖氏法测定血清谷丙转氨酶活性(ALT) 【目的要求】 1.掌握血清谷丙转氨酶活性测定的基本原理。 2.熟悉血清谷丙转氨酶活性测定的具体操作方法。 3.了解血清谷丙转氨酶活性测定的临床意义。 【实验原理】 【实验原理】 丙氨酸+ 【实验试剂】 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.4） 2．基质缓冲液 精确称取D-L-丙氨酸1.79g,α-酮戊二酸29.2mg,先溶于0.1mol/L磷酸盐缓冲液约50ml中,用1mol/L NaOH调pH至7.4,再加磷酸盐缓冲液至100ml,每升底物缓冲液中可加氯仿防腐,4℃保存。 3．1.0mmol/L 2，4-二硝基苯肼溶液 4．0.4mol/L NaOH溶液 5．2.0mmol/L丙酮酸标准液 6．待测标本: 病人血清或质控血清。 【操作步骤】 （1）待测血清的测定 【操作步骤】 （2）校正曲线的制备  【实验结果】 1.校正曲线的制备 以标准管各管的A值-“0”号管的A值,所得差值与对应酶卡门氏单位作图,即成校正曲线。 2.测定管 测定管A值-对照管A值,根据所得差值，从校正曲线查得标本中ALT的卡门氏单位。 参考值范围：5-25卡门单位 【注意事项】 1.血清和底物应于37℃水浴后操作,最好置37℃水浴箱中操作。以一定时间加入，各管即时混匀,以第一管开始计时,准确反应30分钟