第一章--总论-4---打印版.pptVIP

第四节 结构研究法 determination of structure 2、离子源种类 EI-MS 电子轰击 CI-MS 化学电离 FI-MS 场致电离 FD-MS 场解析电离 FAB-MS 快速原子轰击 ESI-MS 电喷雾电离 MALDI-MS 基质辅助激光解吸电离质谱 (M+B) + Afast ? [M+H]+ + [B-H]- + A [1] (M+B) + Afast ? [M-H]- + [B+H]+ + A [2] M + [B+H]+ ? [M+H]+ + B [3] (M+B) + Afast ? M+? + B + A + e- [4] M：样品分子 B：底物分子 A fast: 高速原子（离子） 产生的离子 当用正电场时，在ESI温和的条件下样品分子通常带上质子、碱金属离子或铵离子生成正离子的加合离子 当用负喷雾电场时，通过除去质子或其它阳离子而生成负离子 所带电荷的多少取决于所得的带正电荷或负电荷的分子中酸性或碱性基团的体积和数量 通常小分子得到[M+H]+ 、[M-H]-或二聚物[2M+H]+单电荷离子。而生物大分子产生多电荷离子，如[M+nH]n+ 或[M-nH]n- 单电荷离子 它是（目前）最软的电离技术，通常只产生分子离子 峰， 因此可以测定不稳定的极性化合物，并可直接测定混合物。 由于质谱仪测量的是质量电荷比（质荷比m/z），因此质量范围只有几千质量数的质谱仪，利用ESI法能够检测质量数十万的生物大分子，如蛋白质和寡核苷酸等。 通过调节离子源参数（改变取样锥体电压），可以控制离子在离子源内的断裂，从而给出结构信息（源内CID）。 六、紫外-可见吸收光谱（UV） 1、 原理：是分子中某些价电子吸收了一定波长（200～700nm）的紫外-可见光，由低能级跃迁到高能级而产生的一种光谱。 2、 含有共轭双键、发色团及具有共轭体系的助色团分子在紫外-可见光区域可产生吸收即由相应的π→π * 、n→π *跃迁所引起 。 3、 常用于含共轭双键、α，β-不饱和羰基结构的化合物以及芳香族化合物的结构鉴定。 （1）σ→ σ*跃迁：饱和烃（甲烷，乙烷）E很高，λ150nm，无紫外可见吸收（远紫外区） （2） n → σ*跃迁：含杂原子饱和基团（—OH，—NH2）E较大，λ ~ 200nm末端吸收（真空紫外区） （3） π→ π*跃迁：不饱和基团（—C＝C—）E较小，孤立π→ π* λ~ 200nm体系共轭，E更小，λ更大 （4） n→ π*跃迁：含杂原子不饱和基团（—C ≡N ，C＝ O ）E最小，λ 200~400nm（近紫外区） 按能量大小：σ→ σ* n → σ* π→ π* n→ π* 图示 3、相关的基本概念 （1）吸收光谱（吸收曲线）：不同波长光对样品作用不同，吸收强度不同以λ~A作图 （2）吸收光谱特征：定性依据吸收峰→λmax吸收谷→λmin肩峰→λsh末端吸收→饱和n-σ跃迁产生 图示 back （3）生色团（发色团）：能吸收紫外-可见光的基团 有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基团具n电子和π电子的基团产生 n→π*跃迁和π→ π*跃迁，跃迁E较低 例： C＝C；C＝O；C＝N；—N＝N— (4) 助色团： 本身无紫外吸收，但可以使生色团吸收峰加强同时使吸收峰长移的基团 （5）红移和蓝移： 由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基） 或采用不同溶剂后 吸收峰位置向长波方向的移动，叫红移（长移） 吸收峰位置向短波方向移动，叫蓝移（紫移，短移） （6）增色效应和减色效应 增色效应：吸收强度增强的效应 减色效应：吸收强度减小的效应 （7）强带和弱带： εmax105 → 强带 εmin103 → 弱带 4、应用 （1） 用于推断化合物的骨架类型。 黄 酮 UVλnm 248，312（强） 二氢黄酮 UVλnm 276，300（弱） （2） 异构体的判断：反式（trans）异构体的λmax和εmax较相应的顺式（cis）异构体为大（立体障碍影响） （5）Van der waals（范德华） 效应：在空间中两个氢核靠得很近时,核外电子会互相排斥,使这些氢原子周围的电子云密度降低，产生顺磁屏蔽效应，δ值变大. A. 谱图显示1H-1H的偶合关系; B. 谱图中的二维坐标都是1H的化学位移。 C. 处于对角线外的信号称为交叉峰. D. 从交叉峰出发,分别画水平线和垂直线,它们与