贯叶连翘的超临界二氧化碳提取工艺研究.docVIP

　　贯叶连翘的超临界二氧化碳提取工艺研究 【摘要】 目的筛选贯叶连翘的超临界CO2提取最佳工艺条件。方法采用L9(34)正交实验，以金丝桃素含量为指标进行正交实验，对贯叶连翘的超临界CO2提取工艺进行考察。结果贯叶连翘的超临界CO2提取最佳工艺为：取贯叶连翘药材粗粉（过20目筛）进行萃取，萃取压力为30 MPa，提取时间为2 h，萃取温度为45℃，解析压力为7 MPa。 结论运用该工艺提取效率高，稳定性较好，适合大规模生产。 【关键词】 贯叶连翘 超临界二氧化碳提取 正交实验 　　贯叶连翘，亦称圣约翰蓟草，是一种五瓣黄花多年生的草本植物，属金丝桃科猪胶树属，主要产于欧洲、美国及部分亚洲国家，我国分布于四川、陕西、河北、山东等地。近年来由于发现其有抗抑郁作用而广泛流行于欧洲及美国。贯叶连翘含有许多有效成分，包括苯甲基二蒽酮（如金丝桃素Hypericin及其衍生物）以及黄酮类如芦丁、槲皮苷和双芹菜苷元［1］。本实验中采用L9(34)正交设计实验，选择影响贯叶连翘的超临界CO2提取工艺的4个重要因素，即萃取压力、提取时间、提取温度、解析压力，每个因素设3个水平，以金丝桃素含量为指标进行正交实验，筛选贯叶连翘的超临界CO2提取最佳工艺。现报道如下。 1 仪器与材料 1.1 仪器岛津LC-20高效液相色谱仪（日本）（LC-20AB溶剂输出泵，CBM-20Alite系统控制器，Prominence SIL-20AC自动进样器，CTO-20A柱温箱，SPD-20AV UV-VIS检测器，LC Solution 工作站）； 电子 天平BP121S；金丝桃素对照品（美国Sigma公司）；超临界CO2萃取设备（HA420-40-96-EX型，江苏南通华安超临界萃取设备有限公司），其它试剂均为分析纯。 1.2 药材所用贯叶连翘药材购于成都市五块石中药材市场。 2 方法与结果 2.1 样品溶液的制备取贯叶连翘，粉碎，过20目筛，按所选因素及水平(见表1)，采用L9(34)正交表设计实验(见表2)。进行贯叶连翘的超临界CO2提取，得1～9号萃取物，备用。 2.2 金丝桃素含量测定照高效液相色谱法进行测定［2，3］。 2.2.1 色谱条件色谱柱为VP-ODS色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.006 mol/L磷酸氢二钠［87.5∶12.5（V/V）用磷酸调pH至6.5］；流速1.0 ml·min-1；检测波长590 nm；柱温30℃；灵敏度0.01AUFS。在上述色谱条件下金丝桃素色谱峰能达到较好分离。其结果见图1～2。 2.2.2 含量测定精密量取金丝桃素对照品溶液（0.010 2 mg/ml）1.0，2.0，4.0，8.0，16.0 μl，按上述色谱条件进行测定，以浓度（mg/ml）对峰面积积分值（A）进行线性拟合，得回归方程：Y=684 119X+9 095.9，r=0.999 9。分别精密称取上述1～9号萃取物适量置50 ml量瓶，加适量甲醇，超声处理30 min溶解，加甲醇稀释至刻度，滤过，取续滤液作为供试品液，测定， 计算 ，即得。 2.3 结果采用 中国 医统软件包（PEMS）进行处理分析。结果见表3。表2 因素水平表表4 方差分析上述结果表明，C因素有显著的影响，影响因素Cgt;Agt;Bgt;D；且C3A2B2D2为最佳，故贯叶连翘超临界CO2提取最佳工艺为：取贯叶连翘药材粗粉（过20目筛）进行萃取，萃取压力为30 MPa，提取时间为2 h，萃取温度为45℃，解析压力为7 MPa。 3 讨论 超临界流体萃取技术(SFE)是近年来 发展 应用的一种集萃取、分离于一体的萃取技术，具有效率高、速度快、选择性好、无残留溶剂且适用于热敏物质等优点。由于该技术具有上述优点，故在天然药物提取中得到了广泛的应用，但贯叶连翘采用超临界CO2 进行提取的相关研究尚未见报道，一般认为贯叶连翘的主要有效成分为金丝桃素，本次实验对贯叶连翘的超临界CO2提取工艺进行了研究，并建立了HPLC法测定金丝桃素的方法，该法精确、重复性好，可较好地进行贯叶连翘超临界CO2萃取物的质量控制。 【 参考