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霍乱弧菌快速检测卡的临床应用价值.doc
霍乱弧菌快速检测卡的临床应用价值
作者:陈杭薇 吕楠 赵敏 李兵
【摘要】 目的 探讨一步法快诊霍乱技术(快速检测卡)在临床用于霍乱弧菌感染患者的筛查作用。 方法 应用 O1/O139 群霍乱弧菌检测试剂盒(胶体金法)(O1/O139 群霍乱弧菌快速检测卡)检测来我院肠道门诊就诊的72例腹泻患者粪便标本,同时作便常规镜检、动力试验和便培养与之对照。结果 快速检测卡和对照试验均未呈现阳性结果。结论 快速检测卡操作简单方便, 报告结果迅速,无需任何仪器设备,适于在 医院 肠道门诊和部队疫区现场使用,具有推广意义。
【关键词】 霍乱弧菌 快速检测 临床应用
Abstract: Objective To study the screening function of rapid onestep detection of vibrio cholerea by Rapid Immune Colloidal Gold Strip in the patients ples of 72 patients mune Colloidal Gold Strip for vibrio cholerea (O1/O139 kit), and the feces icroscopic examination, culture and motility test as parison.Results Negative results mune Colloidal Gold Strip test and the control test. Conclusion The method of detecting vibrio cholerea mune Colloidal Gold Strip is simple, quick, and suitable in use in intestinal tract department of a hospital or in epidemic military area. It is significant to spread this test technique.
Key l稀释液瓶中,用滴管反复吹打5次以上,拧紧瓶盖备用。(2)从密封袋内取出霍乱弧菌快速检测卡,在非样本端标记样本号。将检测卡直接插入稀释液瓶内,或将试剂卡平置于台面,用滴管吸取瓶内样本液,滴加4滴(约150 μl)于卡的样本孔内,从插入或滴加样本开始计时,让样本液通过毛细作用扩散至检测区,10~15 min 观察结果,15 min 后无效。产生两条玫瑰红色带,则为阳性结果,表明标本内含有O1 群霍乱弧菌抗原(蓝色卡),或O139群霍乱弧菌抗原(黄色卡)。若检测区内仅有一条玫瑰红色带出现, 为阴性结果, 表明样品内无霍乱弧菌或含量过低。(3)对照实验: 将新鲜粪便作悬滴或暗视野显微镜检查,可见穿梭状运动的弧菌,即为动力试验阳性,随后用O1 和(或)O139群抗血清做制动试验。另外,按常规法将粪便标本种入碱胨水增菌液,37 ℃ 培养6~24 h,分离于4号琼脂平板,进行霍乱弧菌培养。
2 结果
2.1 本组72例患者, 血象:WBC(6.6~23.6)×109/L,N 0.54~0.93。粪便常规: WBC 2~30,RBC 3~30。发热20例,体温最高38.7 ℃。确诊为细菌性痢疾15例。
2.2 霍乱弧菌快速检测卡检测结果全部粪便标本均为阴性,但阳性对照卡显示两条清晰的玫瑰红色带。新鲜粪便标本作悬滴或暗视野显微镜检查,未见穿梭状运动的弧菌,动力试验阴性。粪便标本作霍乱弧菌培养全部阴性。
3 讨论
霍乱病的病原诊断一般多采用细菌分离鉴定法。此法须经过增菌、分离培养及血清学鉴定等多个步骤,至少需要20+h 才能得出确切结果。
近年来,陆续报道了一些快速诊断 方法 , 比如多聚酶联反应法(PCR),但此法至少也要4~6 h 才能得结果, 且实验条件要求高,需要特殊的实验室才能进行,因此很难在临床和防疫工作中推广。
本 研究 检测72例腹泻患者粪便标本 应用 快速检测卡,并与动力试验和便培养作对照,虽然均未呈现阳性结果,但是通过检测我们对一步法霍乱快诊技术的掌握和应用意义有了深刻了解。
曾有研究者[1]在实验室内采用模拟霍乱病人粪便标本方法, 检测报告一步法快诊霍乱技术的最低检出菌量为106 cfu/ ml,证实敏感性不及常规的分离鉴定法,因而推测对于含菌量lt;106 cfu/ ml 的粪便标本可能漏检。但罗隆泽等[2]报告79 份便标本直接一步法快诊的结果显示,该法用于疑似霍乱病人和密切接触者粪便标本检出时的阳性率高于常规的分离鉴定法。 分析 原因可能是用常规法漏检的这些患者在就
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