丹参大黄合剂对大鼠重症急性胰腺炎肠源性内毒素血症的治疗作用.pdfVIP

山西医科大学硕士学位论文 丹参大黄合剂对大鼠重症急性胰腺炎肠源性内毒素血症的治疗作用 前言 重症急性胰腺炎 （Severe acute pancreatitis，SAP ）是一种病情进展迅速，并发症多， 病死率高的疾病。继发感染是引起病人 SAP 死亡的主要原因，因继发感染而死亡的病人占 SAP 病人死亡总数的 80%以上。在 SAP 的发病过程中，肠粘膜微循环障碍和缺血-再灌注 损伤和炎症因子的释放，可以对肠粘膜造成损害。 消化道是人体中最大的细菌储存库，寄居着大量的肠内寄生菌，他们之间构成的相互 作用并相对平衡的微生态系统构成了肠粘膜屏障的生物屏障，但是也构成了肠源性内毒素 血症的发病基础。正常情况下肠粘膜屏障保证这些细菌及其产生的有害物质不能通过肠道 进入人体，重症急性胰腺炎患者由于肠粘膜屏障受到破坏，肠道细菌及其内毒素可以通过 肠粘膜屏障入血，造成肠源性内毒素血症。Fine 于 1975 年提出肠源性内毒素血症学说。 1994 年 Widdison AL 等试验证明用非透过性材料隔离腹腔与结肠可防止肠道细菌异位的发 生。现在重症急性胰腺炎发病过程中感染主要来源于肠道这一观点已得到反复的证实和广 泛的认同。所以保护肠粘膜屏障也就成为重症急性胰腺炎治疗时一个重要的思路。 中药丹参和大黄都是我国的两种常用中药。丹参的主要成分是丹参素，丹参有活血调 经，祛瘀止痛，凉血消痈的功效。大黄的主要成分是大黄酸，具有攻下泻火，荡涤肠胃， 清热解毒等功效。丹参和大黄都有应用于胰腺炎的治疗的报道，但是对肠源性内毒素血症 的治疗仍少见报道，机制也函待研究。 1 山西医科大学硕士学位论文 第一部分 重症急性胰腺炎大鼠模型的制备 重症急性胰腺炎大鼠模型的制备方法已经成熟，一般都是应用 AHO 于 1980 年报道的 胰胆管逆行注射的方法。此种方法效果明确，成本低廉，我们也采用这种方法来制作重症 急性胰腺炎的模型。 材料与方法 1 材料 1.1 实验动物：20 只 Wistar 大鼠，体重 250-300g，均购自山西医科大学实验动物中心。实 验前常规饲料喂养一周。 1.2 动物分组：20 只 Wistar 大鼠随机分成两组，即假手术组与模型组，每组 10 只。 1.3 实验试剂： 0.9%生理盐水，双蒸水，10%甲醛，25% 乙醇，50%乙醇，75%乙醇，100% 乙醇，二甲苯，石蜡，戊巴比妥钠，络合碘。 1.4 器械及耗材：10ml 烧杯，50ml 烧杯，盖玻片，载玻片，光学显微镜，称量天枰，自动 包埋切片机，染色缸，手术缝线，5ml 注射器，10ml 注射器，止血钳，组织剪，线剪， 手术刀片，镊子，-80℃冰箱。 1.5 准备工作：用 0.9%生理盐水将牛磺胆酸钠配置成 5%溶液，常温保存。 2 实验方法 2.1 分组称重：实验大鼠标记后根据随机数字分为两组，每组 10 只，并且称重，记录。 2.2 术前准备：术前 12 小时禁饮食。 2.3 麻醉：5%戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉。 2.4 手术操作 2.4.1 模型组操作方法：麻醉妥后将大鼠仰面固定于固定板上。取上腹部正中切口，长约 2-3cm，切开皮肤、腹肌入腹，于胃右下侧找到十二指肠，用镊子轻轻提起十二指肠， 显露胰胆管及肠管间胰腺组织。用小纱条包绕胰胆管肝门部，然后用 1ml 注射器吸取 5%牛磺胆酸钠溶液后，从十二指肠端刺入胰胆管，沿胰胆管向前推进约 2cm ，用止血 钳在肝门部的纱布上用轻轻夹闭胰胆管，缓慢将牛磺胆酸钠注入胰胆管 （计量 0.1ml/100g ），可以见到注入的液体渗入周围胰腺组织中，推注完毕后退出注射器。约 2min 后松开肝门端胰胆管的止血钳和纱布。术中少量出血可用纱布压迫止血。 2.4.2 假手术组操作方法：开腹操作同模型组，入腹后显露十二指肠和胰胆管即可。 2.5 缝合：查无活动性出血，将腹腔脏器复位，用手术缝线连续缝合腹肌，皮肤做间断缝