20120629梅毒实验室诊断.ppt

RPR结果解释示意图 治疗前 治疗后 早 期 一期 二期 早期潜伏 晚 期 晚期潜伏 三期 阳性 阴性 TPPA结果解释示意图 治疗前 治疗后 早 期 一期 二期 早期潜伏 晚 期 晚期潜伏 三期 阳性 阴性 梅毒血清学试验适用范围 检 测 方 法 样 品 种 类 血清 血浆 末梢血 脑脊液 非梅毒螺旋体试验 快速血浆反应素环状卡片试验 (RPR) ? ? 甲苯胺红不加热血清试验（TRUST） ? ? 性病研究实验室试验 (VDRL) ? ? ? 梅毒螺旋体试验 梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) ? ? 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) ? ? 梅毒酶联免疫吸附试验（TP-ELISA） ? ? 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (TP-RT) ? ? ? 荧光梅毒螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） ? ? ? 化学发光免疫测定试验（CLIA） ? ? 梅毒IgM抗体检测（TP-IgM） ? ? ? 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（TP-WB） ? ? 梅毒检测策略与流程 《梅毒检测技术规范》 非梅毒螺旋体抗原血清试验：RPR、TRUST、VDRL 梅毒螺旋体抗原血清试验：TPPA、TPHA、TP-ELISA、RT、FTA-ABS、CLIA、梅毒IgM抗体检测、WB 策略一 采用任何一种非梅毒螺旋体抗原血清试验对样品进行初筛 策略二 采用任何一种梅毒螺旋体抗原血清试验对样品进行初筛 以临床诊断为目的检测策略一 非梅毒螺旋体试验（具体方法） 阴性 报告检测方法及阴性结果 阳性 报告检测方法及阳性结果 梅毒螺旋体试验（具 体方法） 阴性 报告检测方法及阴性结果 阳性 报告检测方法及阳性结果 非 梅毒螺旋体定量试验 报告检测方法及定量结果 以临床诊断为目的检测策略二 梅毒螺旋体试验（具体方法） 阴性 报告检测方法及阴性结果 阳性 报告检测方法及阳性结果 非梅毒螺旋体试验（具体方法） 阴性 报告检测方法及阴性结果 阳性 报告检测方法及阳性结果 非梅毒螺旋体定量试验 报告检测方法及定量结果 梅毒实验室检测策略思考（1） 梅毒实验室检测策略思考（2） ？初筛目的和方法选择 敏感性、特异性（试剂评估） 操作流程（可及性） 试剂的价格、结果时间（可接收性） 策略一和策略二比较 2010年梅毒螺旋体抗原血清学检测试剂评估结果 2010年非梅毒螺旋体抗原血清学检测试剂评估结果 小结 1、非梅毒螺旋体抗原血清学试验阳性往往是梅毒现症感染者，临床上即可开展治疗。 2、定量试验可作为疗效观察的指标。 3、特异性：假阳性反应。 4、敏感性：约1%-2%的二期梅毒病人可以出现因为抗体过量引起的前带反应现象导致结果假阴性。 5、可作为梅毒螺旋体抗原血清学试验的确诊试验。 小结 尽早完善操作的标准化，杜绝有个人特点的操作。 对于只做TRUST检测的患者要注意： 定性： 阴性，TP-ELISA阳性的稀释定量后报告，排查前带现象后报告。 阳性，TP-ELISA阴性，报告备注中提示“生物学假阳性的可能”。没有TP-ELISA结果的一定要加做检测。 小结 标准化操作。 对TP-ELISA结果有争议的，可用TPPA进一步验证。或是用reiter株对血清进行吸收后再检测。 小结 根据目的选择检测方法及检测策略。可采用任何一类梅毒血清学检测方法作为筛查试验。 策略一 采用任何一种非梅毒螺旋体抗原血清试验对样品进行初筛 策略二 采用任何一种梅毒螺旋体抗原血清试验对样品进行初筛 梅毒自动旋转仪 检测流程 操作步骤： 将检测试剂盒从冰箱中取出，室温放置30分钟。 测RPR自动旋转仪转速。 在RPR纸卡上编上相应的待检样本的编号。 测速:100转/MIN （±2转） 测旋转幅度:19mm 检测流程（定性） 加样： 吸取50μl血清（浆）放在卡片圈中，并均匀地涂布在整个圈内。 加抗原： 将抗原轻轻摇匀，用试剂盒提供的针头加1滴抗原。 反应： 将卡片置梅毒自动旋转仪8分钟立即在亮光下观察结果。 检测流程（定量） 稀释液准备： 在圈内加入50μl生理盐水（根据需要确定稀释度），勿将盐水涂开。 加样： 吸取50μl血清(浆)与各圈中盐水作系列稀释，并涂布满整个圈内。 重复定性试验后两步。 临床意义 早期梅毒（一期、二期）经足量规则抗梅毒治疗后3个月，VDRL试验抗体滴度下降2个稀释度，6个月下降4个稀释度。 一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒治疗后血清滴度下降缓慢，2年后约50%病人血清反应仍为阳性。 临床意义 早期梅毒硬下疳出现1周