第十三章：基因工程技术的应用.ppt

第十三章基因工程技术的应用 从20世纪70年代发展起来的基因工程技术，在40年中得到了迅速发展，并已成为生物技术的核心技术。其应用已进入人类生活的各个领域。涉及工业、农业、环境、能源和医药卫生等。目前基因工程技术的应用主要包括基因工程药物、病毒基因工程、细菌基因工程、酵母基因工程、植物基因工程（转基因植物）、动物基因工程（转基因动物）、医药基因工程（含人类基因治疗）等。 13.1 基因工程药物 13.1.1 基因工程激素类药物 13.1.2 基因工程细胞因子类药物 13.1.3 基因工程抗体 13.1.4 基因工程受体 13.1.5 基因工程疫苗 13.2 大肠杆菌基因工程 13.3 酵母基因工程 13.4 植物基因工程 13.5 动物基因工程 13.6 基因工程中存在的问题 13.1 基因工程药物 自20世纪80年代初第一种基因工程产品----人胰岛素投放市场以来，以基因工程药物为主导的基因工程应用产业已成为全球发展最快的产业之一。目前已有近百种基因工程药物投放市场，应用前景十分广阔。 基因工程药物主要包括细胞因子、抗体、疫苗、激素和寡核苷酸药物等，它们对预防和治疗人类的肿瘤、心脑血管疾病、遗传病、各种传染病、糖尿病、类风湿疾病等有重要作用。 13.1.1 基因工程激素类药物 激素是一类由生物体内分泌腺或特异性细胞产生的微量有机化合物，根据其化学性质可分为多肽蛋白类激素、甾醇类激素和脂肪酸类激素。基因工程类激素主要指通过基因工程方法合成的蛋白多肽类激素。目前上市的激素类药物有胰岛素（insulin）、人生长激素（human growth hormone）、人促卵泡激素（human follical stimulating）等。 生长激素是一类由动物脑垂体前叶分泌的能促进生长的蛋白类激素。1944年首次从牛的脑垂体中分离出来，1956年又从人脑垂体中分离出来。1969年人生长激素的氨基酸序列被确定，191个AA，21.5 kDa 。20世纪70年代末至80年代初，对人生长激素基因进行了研究，确定了人生长激素基因的cDNA序列及在染色体上的位置。1985年美国FDA批准第一代重组人生长激素（在E.coli中表达，N端比天然的多了一个met残基）上市。 13.1.2 基因工程细胞因子类药物 细胞因子（cytokine）是由细胞分泌的能调节生物有机体生理功能，参与细胞的增殖、分化和凋亡的小分子多肽类物质。自1957年第一种细胞因子----干扰素发现以来，已有数百种被发现，其中有数十种通过基因工程技术获得表达并用于医学临床试验，被批准上市的细胞因子产品也有十几种，如：干扰素、集落刺激因子（如红细胞生成素EPO）、白细胞介素、肿瘤坏死因子、趋化因子和生长因子等。 13.1.3 基因工程抗体 抗体是在抗原刺激下产生的，能与相应抗原发生特异性免疫反应的蛋白质分子。抗体是体液免疫中起免疫功能的主要成分，其生理功能包括：与特异性抗原结合发生免疫反应，活化补体，通过与不同的受体结合而介导Ⅰ型变态反应或调节吞噬细胞的吞噬功能。临床上用于抗肿瘤、抗感染、防止器官移植中的排斥反应、抗血栓的形成和解毒等。 主要有鼠源单克隆基因工程抗体、人源单克隆抗体和小分子抗体。 鼠源单克隆基因工程抗体，是目前临床上多数使用的基因工程抗体，缺点是重复用药时会产生抗鼠抗体而导致疗效降低。可通过基因工程将鼠源单克隆抗体进行改进，构建人—鼠嵌合抗体或人源化抗体，已用于抗肿瘤、抗病毒、抗移植排斥反应和抗过敏反应等治疗中。 人源单克隆抗体是针对鼠源单克隆抗体存在抗鼠免疫反应的缺陷而发展起来的。目前有两种方法制备：一是将人的整套抗体基因克隆到噬菌体载体上，构建抗体基因库，抗体基因与噬菌体编码外壳蛋白基因相连，抗体与外壳蛋白以融合蛋白的形式进行表达，分离带抗体片段的噬菌体颗粒，再通过纯化即获得不同的特异性抗体。二是以人的抗体基因置换小鼠的全套抗体基因，通过抗原物质刺激小鼠，表达出人源特异性抗体。 13.1.4 基因工程受体 受体是指细胞表面与各种配体如抗体等进行特异性结合的大分子物质，它一般为糖蛋白。它的主要功能是接受并传递信号到细胞内，引发细胞的调控系统并产生一系列生理变化。根据与受体结合的配体种类不同，可将受体分为细胞因子受体、免疫球蛋白受体、补体受体和抗原受体等。 用于治疗上的受体一般为可溶性受体。 基因工程肿瘤坏死因子（TNF）受体是目前在临床上使用的细胞因子受体之一，其主要功能是与在病理条件下产生过多的肿瘤坏死因子结合，从而达到封闭肿瘤坏死因子的病理效应。 利用基因工程可获得可溶性的免疫球蛋白受体，在临床上可以治疗一些自身免疫性