ＨＬＡ－ＤＲ基因与肝细胞癌的相关性研究.docVIP

　　ＨＬＡ－ＤＲ基因与肝细胞癌的相关性研究 作者：王义成　李建忠　李长缨　柳富会 　　【摘要】 目的 探讨 中国 HBV感染人群HLA-DR基因与肝细胞癌的相关性。方法 应用 　　PCR-SSP方法对102例慢性乙型肝炎患者(实验1组)、38例肝硬化患者(实验2组)、34例肝细胞癌患者(实验3组)及1383例中华骨髓库山东分库无血缘关系自愿骨髓捐献者(对照组)的HLA-DR等位基因进行检测，分析其表达与肝细胞癌的相关性。结果 HLA-DR1在实验3组中的分布频率较对照组明显增高(χ 2 =4．80，Plt;0．05)，HLA-DR13在实验3组中的分布频率较实验1组明显增高(χ 2 =5．56，Plt;0．05)，实验2组与实验3组比较差异均无统计学意义。结论 HLA-DR1可能是肝细胞癌的易感基因，携带HLA-DR13基因位点的HBV感染者更易 发展 为肝细胞癌，HLA-DR各等位基因表型频率在肝硬化和肝细胞癌患者中的分布无差异。 　　【关键词】HLA-DR；肝细胞癌；肝硬化；慢性乙型肝炎 　　 　　【Abstract】 Objective To investigate the association beta.Methods Experiment groups a(group3)．The control group arro China Marroore frequent in group3 pared ore frequent in group 3 pared ight be associated a．Patients a easier.All kinds of HLA-DR allelic genes had no significantly different frequency beta. 　　【Key a；Liver cirrhosis；Chronic hepatitis B 　　 　　肝细胞癌(HCC)是世界范围内发病率很高的恶性肿瘤之一，全世界每年新增病例超过100万人，尤其亚太地区居多。在我国90%以上HCC患者伴有HBV感染，持续HBV感染发生HCC的概率比正常人高100~200倍，约有10%~25%的慢性乙型肝炎(CHB)最终发展为HCC [1] 。HBV感染后，机体对病毒的清除能力及感染后疾病的转归，很大程度上取决于个体间基因组的差异。而后者主要取决于人类主要组织相容性复合体(MHC)。人类白细胞抗原(HLA)是MHC的基因产物，其中HLA-DRB1的基因多态性最为复杂，它在HBV感染的各种预后中发挥重要作用。本研究采用PCR/SSP技术对此进行分析，从基因水平了解遗传因素在肝细胞癌的发病机制中所起的作用。 　　1 材料与方法 　　1．1 研究对象 ①实验组：随机选取2007～2008年间青岛市传染病 医院 住院患者174例(均为HBV感染者)，其中慢性乙型肝炎102例为实验1组［男62例，女40例，年龄18~54岁，平均(32．6±12．3)岁］，肝硬化患者38例为实验2组［男18例，女20例，年龄35~73岁，平均(52．5±8．4)岁］，原发性肝癌患者34例为实验3组［男27例，女7例，年龄33~76岁，平均(53．8±9．5)岁］。均按照2005年中华医学会肝病学分会和传染病学分会联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》中的诊断标准进行诊断和分类 [2] ;②对照组：随机抽取中华骨髓库山东省分库无亲缘关系健康志愿骨髓捐献者1383例，其中男654例，女739例，年龄18~45岁，平均(28．6±8．8)岁。 　　1．2 HBV病原学检测 ①HBV免疫标记物检测：ELISA法(厦门新创生物制品有限公司试剂)，操作按说明书；②HBV DNA检测：荧光定量检测法(试剂和仪器均为美国罗氏公司产品)，操作按说明书。 　　1．3 HLA-DR等位基因检测 ①人类DNA提取：采用成品试剂盒(美国戴诺生物有限公司)，操作按说明书，DNA含量：80~100 μg/μl，纯度260 nm/280 nm：1．65~1．80(DNA 定量仪测定)；②HLA-DR等位基因分型：采用美国戴诺生物有限公司试剂，引物可以覆盖2002年以前确定的HLA-DR等位基因，分型等级：低分辨率；PCR-SSP方法，操作按说明书；判读标准：遵循WHO下属HLA系统命名委员会规定，按标准HLA命名系统中星号后的头2个数字，个别等位基因按HLA命名系统中星号后的头4个数字，将等位基因型转化为相应的表现型。 　　1．4 统计学方法 对基因表型频率的组间比较采用χ 2 检验。检验水准α=0．05。 　　2 结果 　　见表1。 　　 　　3 讨论 　　HBV感染呈全球性分布,我国是乙型肝