第2章、菌种培养1.ppt

营养物浓度和生长速率之间的动力学关系：Monod模型 μ= μmaxS/Ks+S μ:比生长速率（1/h） μmax：最大比生长速率（1/h） S:：营养物浓度 克/L Ks：饱和常数或营养物利用常数 克/L，或 mol/L * 微生物生长的Monod模型 * Ks是使μ达到最大比生长率μmax值一半时的营养物浓度, 当一种限制性营养物浓度S大大低于Ks时， μ=μmaxS/Ks，即μ很小，此时生长很慢 当S=Ks时，μ=0.5 μmax，随营养物浓度增加，μ相应增加，逐渐趋向μmax，μ成为营养物浓度的重要函数，此时营养物浓度仍是生长的限制因素，在Monod模型上表现为曲线 * 当营养物浓度S大大高于Ks时，营养物浓度不再影响微生物生长，即S的变化不再成为生长限制因素，此时，μ接近μmax，在Monod曲线上表现为直线 在分批培养时，Ks表示微生物对营养物的亲和力，在一定营养条件下，Ks越小，微生物对限制性营养物的亲和力越大，限制性营养物的浓度必须降低到十分低的水平，才能影响微生物的生长，Ks越大，亲和力越小，即使限制性营养物浓度很高，生长率也下降 * 3. 营养物比例对生长的影响 C/N比 不当，会影响菌体对按比例吸收营养物 不当，改变原来合适的pH环境 氮源不足，表现为菌体繁殖慢，碳源不足表现为菌体容易衰老 生理酸性盐和生理碱性盐的比例也会影响微生物生长的pH环境 * 4. 发酵过程中营养条件的选择 种子质量和发酵初期菌体生长的控制，对发酵是非常重要的 比生长速率最大，延长对数期长，获得更健壮的菌体 在影响的诸多因素中，营养条件最为重要 1）营养物种类 2）营养物比例 3）营养物浓度：对易被吸收的限制性营养物浓度的控制很重要，充足而不过大，过大，对生长的抑制 * （二）溶解氧的影响和选择 氧对好氧和厌氧微生物非常重要 氧在培养液中的饱和浓度只有(0.0032mg/L) 发酵中消耗溶解氧 0.32-0.8mg/L/h 培养液中的氧只能维持微生物正常呼吸14-36秒 * 1. 溶解氧浓度对生长的影响 氧、水和二氧化碳进入细胞是靠扩散作用，培养液中溶解氧和细胞内溶解氧之间的浓度差是氧扩散的动力 在营养物限定的情况下，溶液中溶解氧的浓度是主要因素，溶解氧浓度与呼吸强度密切相关 * 第二章 菌种培养 第一节 微生物的生长 一. 生长现象和繁殖方式 这里指微生物的群体生长，包括个体生长和个体繁殖，在发酵工业中，应用最多的是细菌、放线菌、酵母菌和霉菌 1. 细菌（bacteria） 单细胞原核生物，主要靠分裂繁殖 * 细菌分裂图 * 2. 放线菌 单细胞丝状，主要靠无性孢子进行繁殖（图） * 3. 酵母菌 单细胞真核生物，出芽繁殖和子囊孢子繁殖 （出芽） * 酵母菌子囊孢子 * 4. 霉菌 单细胞或多细胞丝状真菌，发酵工业中应用最多的是青霉、曲霉、毛霉、木霉等（图） * 二. 生长的测定 微生物的生长和产物的生成有着密切的关系，因此测定生长对发酵的控制很重要 1. 测定细胞的数目 1）浊度计比浊法 2）计数器记数法 对于单细胞的微生物或微生物的孢子比较准确，对于菌丝体比较困难 * 2. 测定细胞重量 1）细胞干重称量法 2）细胞堆积容积测量法 3）细胞组成分析法 ：蛋白质 DNA RNA 4) 营养物消耗分析法：测定培养基中不用于合成代谢产物的营养物，如磷酸盐、硫酸盐等 5）产物重量分析法：测定培养中形成的CO2、ATP和H2等 * 三. 群体生长规律（典型细菌生长曲线） growth curve（图） * 1. 延滞期（lag phase） 是微生物生长过程对外界的适应期 个体重量增加，体积增大，活菌数为增加 原生质均匀，嗜碱性强，RNA含量高，酶类的合成和诱导 菌体对外界物理、化学因素的抵抗力弱，“幼龄期”，代谢活跃 发酵生产中，早期保证营养和氧气，使幼龄菌很好生长 * 2. 对数生长期（log phase） 细胞的代时（generation time）最短且恒定，群体细胞以几何级数增加，单位时间内细胞数目或细胞重量的增加（生长速率）恒定 细胞分裂产生的所有菌都是活菌，总菌数与活菌数接近相等 细胞的形态、生理特征一致 在发酵工业中要设法延长此期，获得更多的活细胞（？？？） * 3. 稳定期（stationary phage） 菌体的世代时间加长且不稳定，活菌数的增加与死菌数的增加接近平衡（原因？？？） 如果出现溶菌现象，总菌数将下降 溶