3、1菊花的组织培养(定稿)要点.ppt

指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。 植物组织培养原理： 概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。 原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质 什么叫分化？其实质是什么? 什么叫脱（去）分化、再分化？ 愈伤组织的细胞有什么特点？ 如何控制细胞的脱分化与去分化？ 5. 什么是外植体？ · 二、植物组织培养的基本过程 三、影响植物组织培养的因素： 3、不同植物激素使用顺序 4、不同植物激素使用量 第二课时 复习上节课知识(默写) 植物细胞的全能性、分化、脱分化、再分化、愈伤组织、外植体、植物组织培养的概念 植物组织培养的过程 影响植物组织培养成功的因素有哪几点？ 培养基的主要成分有什么？ 植物组织培养要求的温度和PH值多大？ 最常添加的植物激素是什么？比值大小对植物组织培养有何影响？ 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养，培养期间应定期消毒 培养温度控制在18-22℃ 每日用日光灯光照12h 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录 （四）生根苗的移栽是否合格 （四）培养 （五）移栽 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 3、移栽 幼苗长壮后，移栽到土壤中 （六）栽培 幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花 三、课题延伸 1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ * 萧县郝集中学 菊花的组织培养 ★课题目标 1、说明植物组织培养的基本原理； 2、学习植物组织培养的基本技术； 3、进行菊花或其他植物的组织培养。 ★课题重、难点 植物组织培养过程中使用的无菌技术。 又称：植物离体培养 一、植物组织培养的概念 植物细胞的全能性 阅读32页解决下列问题： 二、植物组织培养的基本过程 基因的选择性表达 愈伤组织 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 未开花植物的茎上部新萌生的侧枝 思考 各种营养物质的作用吗？同专题2中 微生物培养基的配方相比，MS培养基的 配方有哪些明显的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐； 蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压； 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养。 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先细胞分裂素， 后生长素 有利于细胞分裂但不分化 先生长素， 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 促进愈伤组织生长 比值适中 促芽分化， 抑根形成 比值低时 促根分化， 抑芽形成 比值高时 结果 生长素/细胞分裂素比值 思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？ 生长素　/　细胞分裂素 高 利于根和愈伤组织的形成 适中 利于根芽的分化 5、pH、温度、光照（菊花组培） pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 6、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 在植物组织培养的过程中，为什么需要无菌操作？ 思 考 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。 用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长。而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。 因此，植物组织培养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培