高二生物基因工程的基本操.pptVIP

核心要点突破 目的基因的获取 1．两种基因文库的主要区别如下表 文库类型 cDNA文库 基因组文库 文库大小 小 大 基因中启动子 无 有 基因中内含子 无 有 基因多少 部分基因 全部基因 物种间的基因交流 可以 部分基因可以 * 特别提醒 ①细胞中成熟的mRNA是需要在转录后将非编码区转录出的序列切除的，只留下编码区序列，因而从这样的mRNA反转录来的cDNA不会有启动子序列。对于真核生物在转录后的加工过程中还要将内含子部分转录出的序列也切除掉，所以真核生物的cDNA中也不会有内含子序列。 ②cDNA是反转录获得的双链DNA。 ③生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子比较有利于基因的表达。 ④通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录。 * 2．DNA复制、PCR技术和基因克隆的比较 DNA复制 PCR技术 基因克隆 场所 细胞核 生物体外 细胞内 酶 解旋酶、DNA聚合酶 Taq酶 限制酶、DNA连接酶 载体 不需要 不需要 需要 遵循原则 碱基互补配对 碱基互补配对 碱基互补配对 结果 DNA分子 DNA分子片段 DNA分子片段 * 3．提取目的基因方法的比较 途径 从基因文库中直接分离目的基因 人工合基因(真核细胞) 方法 鸟枪法 逆转录法 根据已知氨基酸序列合成DNA * 途径 从基因文库中直 接分离目的基因 人工合基