副猪嗜血杆菌OmpP2刺激猪肺泡巨噬细胞炎性因子mRNA转录及致炎机制初步分析.pdfVIP

畜牧兽医学报 2016.47(7):1428-1434 Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica doi: 10. 11843/j. issn. 0366-6964. 2016. 07. 016 副猪嗜血杆菌 OmpP2 剌激猪肺泡巨噬细胞炎性 因子 mRNA 转录及致炎机制初步分析 何欢，陈新诺，曾泽，任玉鹏，汤承，张斌\岳华铸 (西南民族大学生命科学与技术学院，成都 61004 1) 摘 要:为了研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis , HPS)弱毒株 11 型 H465 株 OmpP2 刺激猪肺泡巨噬细胞 (PAMs)炎性因子 mRNA 的转录和对 NF-，Æ和 MAPKs 信号通路的影响，提取并纯化 HPS 血清 11 型 H465 株的 OmpP2 ，分别用 5 、 10μg mL- 1 OmpP2 刺激 PAMs 6 、 12 h 后收集细胞，提取总 RNA 和蛋白质。将提取的 RNA 反转录成 cDNA，运用 RT-PCR 检测炎性因子ClL-1α 、 IL-1日、 IL-6 、 IL-8 和 TNF-a)mRNA 转录水平。利用 Western blot 方法检测 ERK1/2 ， JNK、 P38 、 P65 和 IκBα 蛋白表达量的变化。结果表明:HPS H465 株的 OmpP2 能够显著地 诱导 IL-1a 、 IL-1日、 IL-6 、 IL-8 和 TNF-α 的 mRNA 转录水平上调(PO.O日，同时能够引起 ]NK、 P65 蛋白表达水平 显著升高和 I，Æa 蛋白表达水平显著降低 (PO.O日。上述结果证实了 HPS 血清 11 型 H465 株的 OmpP2 能够通 过调节 MAPKs 信号通路中 JNK 蛋白以及 NFκB 信号通路中 P65 蛋白和 IκBα 蛋臼降解促进炎性因子 IL-1α、 IL 1ß 、 IL-6 、 IL-8 和 TNF-α 的转录。 关键词:副猪嗜血杆菌;OmpP2; 炎性因子;NF-κB 和 MAPK 信号通路 中图分类号:S852.613 文献标志码:A 文章编号: 0366-6964(2016)07-1428-07 The Initial Research of OmpP2 in Haemophilus parasuis Induces Pro-inflammatory Cytokine mRNA Transcription and Inflammatory Mechanism in Porcine Alveolar Macrophages HE Huan , CHEN Xin-nuo , ZENG Ze , REN Yu-peng , TANG Cheng , ZHANG Bin糖， YUE Hu扩 CCollege of Lífe Science and Technology , Southwest Universíty for Nationalít町， Chengdu 610041 , China) Abstract: The aim of this study was to explore the role of out membrane protein P2 (ümpPZ) in Haemophilus ρarasuis serovar 11 reference H465 strain to induce pro-inflammatory cytokine mR NA transcription , and NF- I(B and MAPKs signaling pathways ín porcine alveolar macrophages (PAMs). The OmpP2 was extracted from the H. parasuis H465 and stimulated in PAMs with 5 and 10μg • mL -1 for 6 and 12 hour