分子生物学复习201411.pptVIP

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  • 2017-05-14 发布于广东
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分子生物学复习201411

分子生物学复习 题型及分数分配 名词解释:10个(30分) 简答题:3个(30分) 问答题:1个(40分) 病毒癌基因(viral oncogene):存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中,并非病毒生长繁殖所必需, 能使靶细胞发生恶性转化的基因,它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用。 什么是同源重组?同源重组需要具备哪些条件? 1、同源重组发生在DNA的同源序列之间,涉及到参与重组的双方DNA分子的断裂与重接。 2、进行同源性重组必须具备下列基本条件: (1)在交换区具有相同或相似的序列。发生同源性重组 的两个区域的核苷酸序列必须是相同或非常相似的。同源性 重组常常只发生在两个DNA分子中的相同部位。 (2)双链DNA分子之间互补碱基进行配对。两个DNA分 子的链之间互补的碱基配对确保重组只发生在同样的基因座 之间。在该部位两个双链DNA分子通过链之间互补的碱基配 对被维系在一起称为联会。 (3)重组酶。参与重组反应的酶保证重组的顺利进行 。重组过程中,每个分子的链首先断裂,然后进行修复和 连接,两个DNA分子之间发生交换。重组完成后,重组分 子的解离和释放等过程均是在酶催化下进行的。 (4)异源双链区的形成。同源性重组时,在两个DNA 分子之间互补碱基配对的区域称为异源双链区( heteroduplex region)。两个DNA分子通过一段异源DNA 双螺旋共价相互连接。 (1)Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码 (2)这个mRNA分子的启动子紧接着O区,而位于I与O之间的启动子区(P),不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。 (3)操纵基因是DNA上的一小段序列(仅为26bp),是阻遏物的结合位点。 (4)当阻遏物与操纵基因结合时,lac mRNA的转录起始受到抑制。 (5)诱导物(如,IPTG)通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵基因结合,从而激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时,操纵基因区没有被阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。 用图表示乳糖操纵子的结构,简述葡萄糖、乳糖、CAP等影响因子参与乳糖操纵子的调控机制。 (1)葡萄糖对lac操纵子的影响 如果将葡萄糖和乳糖同时加入培养基中, lac操纵子处于阻遏状态,不能被诱导;一旦耗尽外源葡萄糖,乳糖就会通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵基因结合,从而激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时,操纵基因区没有被阻遏物占据,所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。 (2)cAMP与代谢物激活蛋白(CAP) ATP经腺甘酸环化酶作用得到cAMP,cAMP与CAP形成复合物。当无葡萄糖,cAMP浓度高时,cAMP与CAP复合物弯曲与NRA聚合酶结合,促进lac mRNA的合成。有葡萄糖,cAMP浓度低时不促进转录。 图示色氨酸操纵子的结构,并简述其特点 调控基因 结构基因 催化分枝酸转变 为色氨酸的酶 trpR 特点: (1) trpR 和trpABCDE 不连锁; (2) 操纵基因在启动子内 (3) 有衰减子(attenuator)/弱化子 (4) 启动子和结构基因不直接相连,二者被前导序列(Leader)所隔开 简述肺炎双球菌的体内和体外转化实验,证明了遗传物质是DNA而不是蛋白质。 (1)肺炎双球菌体内转化实验 ①将R型的活细菌注射到小鼠体内,小鼠不死亡。而将S型的活细菌注射到小鼠体内,小鼠患败血症死亡。说明,S型的活细菌对小鼠有毒,而R型的活细菌无毒。 ②将加热杀死的S型菌注射到小鼠内,小鼠不死亡。说明加热杀死的S型细菌对小鼠无毒害作用。 ③将R型的活细菌与加热杀死的S型菌混合,注射到小鼠内,小鼠死亡,并检测出有S型细菌。说明,小鼠体内R型活细菌在加热杀死的S型细菌的作用下可以转化为S型活细菌。 肺炎双球菌体内转化实验表明:在加热杀死的S型细菌中,必然存在某种活性物质——转化因子,促使小鼠体内R型活细菌转化为有毒性S型活细菌。 (2)肺炎球菌体外转化实验 ①实验操作:将S型细菌中的多糖、 蛋白质、脂类和DNA、DNA酶+DNA等提取出来,分别与R 型细菌进行混合培养。 ②实验结果:只有加入DNA,R型细菌能转化成S型细菌;并且DNA的纯度越高,转化就越有效。 ③结论:DNA是遗传物质。 简述噬菌体侵染细菌的实验直接证明了DNA是遗

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