ＭＭＰ－９、ＣＯＸ－２在膀胱尿路上皮癌表达的研究.docVIP

ＭＭＰ－９、ＣＯＸ－２在膀胱尿路上皮癌表达的研究 　　[摘要] 目的 研究膀胱尿路上皮癌(BUC)中 MMP??9、COX??2的表达水平,阐明其与膀胱癌的生物学行为的关系。 　　方法 采用免疫组化法对43例膀胱尿路上皮癌标本和10例对照组标本中MMP??9、COX??2的表达量检测并进行比较。结果 MMP??9与COX??2在正常黏膜与不同病理分级和临床分期中的阳性率均有显著性差异(??P??0.05或0.01)。MMP??9和COX??2的阳性率随病理分级和临床分期的上升而显著升高。MMP??9和COX??2表达有相关关系(??P??0.01)。结论 MMP??9和COX??2的表达与BUC的生物学行为关系密切,为尽早了解膀胱癌侵袭、转移提供帮助。 　　[关键词] 膀胱尿路上皮癌;基质金属蛋白酶??9;环氧化酶??2;表达?? 　　文章编号:1003-1383(2009)04-0410-02 　　中图分类号:R 737.14 　　文献标识码:A 　　doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2009.04.016 　　 　　膀胱癌(BC)是人类泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一, 发病率在国内居泌尿系统恶性肿瘤的第一位,且发病率逐年增加,在欧美国家仅次于前列腺癌而居第二位。BC男女之比5∶1,60岁以后发病率高,平均诊断年龄为71岁。BC中膀胱尿路上皮癌(BUC)占90%以上,超过70%的BUC在治疗后复发,复发肿瘤中约30%出现恶性程度增加。浅表性BUC复发率为50%～70%,而且10%～15%复发BUC浸润至肌层????[1]??。因此早期诊断是成功治疗BUC的重要条件。笔者检测膀胱尿路上皮癌和正常膀胱黏膜中基质金属蛋白酶??9(MMP9)和环氧化酶??2(COX??2)的表达,研究其与膀胱癌的生物学行为的关系。 　　 　　资料与方法 　　 　　1.病例资料 来自本院病理科2004年1月至2006年12月确诊为BUC的外检档案43例,同时收集10例正常膀胱组织作为对照。参照WHO关于泌尿与生殖系统肿瘤分类标准????[2]??,病理形态包括非侵袭性尿路上皮肿瘤和浸润性尿路上皮癌两大类。结合病理形态与生物学行为分为3级,临床分期按UICC??TNM分期标准分浅表性肿瘤(Tis??T??1)和浸润性肿瘤(T????2??4??)。病例分布具体如下:①I级:包括低度恶性潜能非侵袭性乳头状尿路上皮肿瘤(PUNLMP,Tis)1例;非侵袭性乳头状尿路上皮癌低级别(NIPUC??LG,Tis??T??1)3例;非侵袭性乳头状尿路上皮癌高级别(NIPUC??HG,T??1)5例;尿路上皮原位癌(UCIS,T??1)1例。②Ⅱ级:浸润性尿路上皮癌低级别(IPUC??HD,T??2)22例。③Ⅲ级:浸润性尿路上皮癌高级别(IPUC??LD,T????3??4??)11例。?? 　　2.实验试剂 鼠抗人MMP??9抗体,COX??2单克隆抗体,二抗采用生物素标记IgG,购自DAKO公司,由博士德生物技术有限公司提供。链亲和素-过氧化物酶(SP)试剂盒购自迈新公司。?? 　　3.免疫组织化学染色法 组织石蜡包埋,4μm 厚切片, 　　常规处理后,微波炉抗原修复,依次加入稀释的一抗(工作浓度均为1∶100) 、生物素标记二抗、SABC,DAB 显色、苏木素复染,用已知阳性片作阳性对照,PBS 代替一抗作空白对照。4.结果判读标准 MMP??9:染色阳性为胞浆内出现棕色和棕黄色。显微镜下组织被染成棕黄色的为阳性(+),其阳性细胞数80%;组织没有着色为阴性????[3]??。COX??2:阳性表达定位于细胞浆,呈浅黄色至深棕色。阳性判定标准:依据阳性细胞数和阳性反应强度两项指标:阳性着色细胞数10%定为阳性表达; 阳性反应强度以浅黄色为弱阳性定为(+)、黄色或棕黄色为中等阳性定为(++)、棕色或者深棕色为强阳性定为(+++),无棕黄色或与背景着色一致为阴性????[4]??。?? 　　5.统计学处理 检测结果采用SPSS软件处理,组间比较行χ??2检验,两因素间行相关性分析。 　　 　　结果 　　 　　1.MMP??9和COX??2表达与膀胱癌病理分级、临床分期的关系 两者的表达与BUC的关系密切。MMP??9与COX??2在正常黏膜与不同病理分级和临床分期中的阳性率均有显著性差异(??P??0.05或0.01)。MMP??9和COX??2的阳性率随病理分级和临床分期的上升而显著升高,见表1。?? 　　表1 MMP??9和COX??2在BUC病理分级、临床分期中阳性表达 例(%) 　　类别nMMP??9阳性COX??2阳性 　　正常黏膜100(0.0)0(0.0) 　　Ⅰ级102(