Expression of epithelial calcium transport system in rat cochlea and vestibular labyrinth.docVIP

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2017-05-16 发布于上海
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Expression of epithelial calcium transport system in rat cochlea and vestibular labyrinth.doc

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Expression of epithelial calcium transport system in rat cochlea and vestibular labyrinth

Yamauchietal.BMCPhysiology2010,10:1 /1472-6793/10/1 RESEARCH ARTICLE OpenAccess Expressionofepithelialcalciumtransportsystem inratcochleaandvestibularlabyrinth DaisukeYamauchi1,3?,KazuhiroNakaya1,3?,NithyaNRaveendran1,DonaldGHarbidge1,RuchiraSingh2, PhilineWangemann2,DanielCMarcus1* Abstract Background:ThelowluminalCa2+ concentrationofmammalianendolymphintheinnerearisrequiredfor normalhearingandbalance.WerecentlyreportedtheexpressionofmRNAforaCa2+-absorptivetransportsystem inprimaryculturesofsemicircularcanalduct(SCCD)epithelium. Results:WenowidentifythissysteminnativevestibularandcochleartissuesbyqRT-PCR,immunoblotsand confocalimmunolocalization.Transcriptswerefoundandquantifiedforseveralisoformsofepithelialcalcium channels(TRPV5,TRPV6),calciumbufferproteins(calbindin-D9K,calbindin-D28K),sodium-calciumexchangers (NCX1,NCX2,NCX3)andplasmamembraneCa2+-ATPase(PMCA1,PMCA2,PMCA3,andPMCA4)innativeSCCD, cochlearlateralwall(LW)andstriavascularis(SV)ofadultrataswellasCa2+ channelsinneonatalSCCD.All componentswereexpressedexceptTRPV6inSVandPMCA2inSCCD.1,25-(OH)2vitaminD3(VitD)significantlyup- regulatedtranscriptsofTRPV5inSCCD,calbindin-D9KinSCCDandLW,NCX2inLW,whilePMCA4inSCCDand PMCA3inLWweredown-regulated.TheexpressionofTRPV5relativetoTRPV6wasinthesequenceSVNeonatal SCCDAdultSCCDLWprimarycultureSCCD.ExpressionofTRPV5proteinfromprimarycultureofSCCDdid notincreasesignificantlywhencellswereincubatedwithVitD(1.2timescontrol;P0.05).Immunolocalization showedthedistributionofTRPV5andTRPV6.TRPV5wasfoundneartheapicalmembraneofstrialmarginalcells andbothTRPV5andTRPV6inouterandinnersulcuscellsofthecochleaandintheSCCDofthevestibularsystem. Conclusions:ThesefindingsdemonstrateforthefirsttimetheexpressionofacompleteCa2+ absorptivesystemin nativecochlearandvestibulartissues.RegulationbyvitaminDremainsequivocalsincetheresultssupportthe regulationofthissystematthetranscriptlevelbutevidenceforcontroloftheTRPV5channelproteinwaslacking. Background The Ca2+ absorptive system