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3个陆地棉球蛋白基因启动子的克隆与功能初步分析.pdf
COttOD ScíeDce
棉花学报 Cotton Science 2016 , 28(2): 104-114
3 个陆地棉球蛋白基因启动子的克隆与功能初步分析
魏琦超 l2 ，张锐 l ，lIJ\ 国清 l ，孟志刚 l ，周焘 l ，赵雷霖 l ，郭三堆 1*
(1.中国农业科学院生物技术研究所，北京 100081 ;2 ，河南科技学院生命科技学院，河南新乡 453003)
摘要:为克逢陆地棉来源的种子特异性启动子，根据雷蒙德氏棉测序结果，设计针对 GhαGLOA、 GhßGLOA 和
GhβGLOB 基因编码区上游约 1.5 kb 序列的引物，分别以陆地棉总 DNA 为模板克隆了 3 条序列。构建了含有
编码区上游序列驱动 GUS 的表达载体，经农杆菌介导转化野生型拟南芥。转基因拟南芥种子的 GUS 活性荧
光检测结果表明，所克隆序列具有启动子功能，其中 GhαGLOA 启动子的转录活性极显著高于其他 2 个启动
子。在转基因拟南芥成体植株的多个器官中仅可检出痕量的 GUS 活性认为所克隆启动子为种子特异性启
动子υ
关键词:陆地棉;球蛋白;启动子;种子特异性启动子;顺式作用元件
中图分类号: S562.03 文献标志码:A
文章编号: 1002-7807(2016)02-0104-11 DOI: 10.1 1963/issn. 1002-7807 .201602002
Cloning and Preliminary Analysis of the Function of Three Globulin Genes Promoters
from Gossypium hirsutum L.
l l l l l
Wei Qichao口，Zhang Rui , Sun Guoqing , Meng Zhigang l, Zhou Tao , Zhao Leilin , Guo Sandui *
(1. Bío优chnology Research Institute, Chinese Academy ofAgriculturaJ Sciences, Beijing 100081 , China; 2. School of Lífe Sci-
ence and TechnoJogy, Henan lnstitute ofScience and TechnoJogJ包 Xinxiang， Henan 453003 , China)
Abs1ract: The aim of this study is to clone seed-specific promoter from Gossypium hirsutum. Using the genome sequence of
Gos.号φium raimondii, primers were designed and synthesized. Upstream sequences of GhαGLOA， GhßGLOA, and GhßGLOB
were amplified using total DNA of G. hirsutum as the template. Expression plasmids of GUS driven by the three upstream se-
quences were introduced into Arabidopsis 的a/iana. GUS activity was tested in seeds of transgenic Arabidopsis by fluorometric
assay. The results showed that the three cloned sequences fun
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