实验一、二卷心菜中过氧化物酶的提取、活力测定及热稳定性.pptVIP

实验一、二 卷心菜中过氧化物酶的提取、活力测定及热稳定性的初步研究 实验目的 掌握酶提取方法，学习测定过氧化物酶活性的方法。 实验原理 果蔬中的过氧化物酶（peroxidase）往往具有较高的热稳定性，对果蔬进行热烫处理时，常以过氧化物酶是否失活作为热烫是否充分的标准。果蔬热烫之后，如果其过氧化物酶完全（或 95%以上）被破坏，那么就可以认为存在于果蔬中的其它酶都已失活。许多研究表明果蔬中的过氧化物酶有热稳定和热不稳定两部分。这两部分的比例取决于果蔬的品种和热烫处理的温度。 过氧化物酶催化的典型反应为： H2O2 ＋ AH2 A ＋ 2H2O AH2是无色的还原性化合物，如果它经过氧化转变成有色的A，那么反应体系在特定波长下的吸光值就会随反应进行而增加。因此，可以用分光光度法测定过氧化物酶的活力。 实验试剂 1、0.05mol/L 磷酸盐缓冲液 pH7.0，含 1.0mol/L NaCl (缓冲液Ⅰ) 2、0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 pH7.0 (缓冲液Ⅱ) 3、1%邻苯二胺-乙醇溶液 4、0.3%过氧化氢溶液 实验步骤 1、从卷心菜中提取过氧化物酶 40克卷心菜+40毫升（缓冲液Ⅰ）