第7章节色谱剖析法导论”.pptVIP

第七章 色谱分析法导论 基本要求： 了解色谱法的分类及其特点。了解色谱图和保留值、容量因子、分离度等色谱术语。了解色谱定性和定量方法，了解校正因子、相对校正因子，以及归一化法、外标法和内标法等分析方法。 第一节 概论 一、色谱分析法应用 1.定量分析 主要分析有机物，也可分析部分无机物。 2.简单定性 回答“是不是” 二、色谱法与色谱分析方法 1.色谱法 是一种物理化学的分离方法 创造人：俄国植物学家茨维特（M.Tswett）1905年，分离植物色素的试验。分离后，在玻璃管内呈现出不同颜色带，色谱一词由此得名。后来，也用来分离无色物质，习惯上仍称为色谱法。 在色谱分离装置中，流动的那一相称为流动相，固定不动的那一相称为固定相。 色谱法：是利用混合物各组分在固定相和流动相中具有不同分配系数（或吸附系数、渗透能力等），当两相作相对运动时，这些物质在两相中进行多次反复分配而实现分离。 2.色谱法分类 有三种分类方法 新型：超临界色谱，以超临界状态下的CO2作流动相。接近液体的溶解性和气体的流动性，兼有液相、气相色谱的优点。 ⑵按固定相的固定方式分类 ⑶按分离机理分类 3、色谱分析法 将色谱分离方法与适当的检测手段相结合，用于化学物质分析的方法。是一种仪器分析方法。 ⑴方法分类 气相色谱法，液相色谱法（均属柱色谱） ⑵仪器分类 气相色谱仪，液相色谱仪 三、色谱分析法的特点： 1.分离效能高（最突出的优点） 一般的分离手段（萃取、蒸馏等）与之无法相比。 例：GC可将石油中的二百多个组分一次全部分开，LC可将食品中的氨基酸（可多达20多种）一次分开。 2.灵敏度高 检测限可以达到ppm～ppb，与之配备高灵敏度的检测器有关。常见检测器有：热导池、氢焰检测器、电子捕获器等等。 3.所需样品量很小（xxμL） 在疾病诊断、病人抽血、刑事侦察方面有较大意义。 4.分析速度快 一次色谱分析一般只需要几分钟～几十分钟，最快只需几秒钟，与高效率的分离和计算机的应用有直接关系。 5.应用范围广 GC与LC相结合，几乎可以分析全部的常见有机物。 第二节 色谱图及相关术语 一、色谱过程示意图 二、色谱图 试样中各组分经色谱柱分离后依次进入检测器，由记录仪记录的电信号强度—时间曲线，称为色谱图，也叫做流出曲线。 1.基线 没有组分进入检测器时，系统噪声随时间变化的线称为 基线。稳定的基线是一条直线。 2.色谱峰 组分的响应信号随时间变化而形成的峰形曲线。 正常情况下，每一种组份对应一个峰，且色谱峰呈对称性。 3.峰高（h） 峰顶点到基线的距离。 ４.峰底宽度（Ｗb） 峰拐点切线与基线延长线相交的截距。 ５.半峰宽（Ｗ１／２） 峰高一半处的峰宽度。 ６.峰面积（Ａ） 峰与基线延长线所包围的面积。 三、保留值 保留值是表示样品中各组份在色谱柱中滞留时间的数值。 在固定的试验条件下，每一种组份都有固定的保留值。 是色谱定性的依据。 2.死时间（t。） 不被固定相保留的组份（如GC中的空气）通过色谱柱所需的时间。 实际上就是流动相流经色谱柱所需的时间。 t。=L/ū （式中 L：柱长 ū：流动相平均线速度) 3.调整保留时间（tR’） 某一组份在固定相中停留时间的总和。 tR’= tR －t0 （即： tR= t0+ tR’ ） 四、相对保留值与选择性 相对保留值：某组份2的调整保留值与组份1的 调整保留 值之比。 tR2’ ：为后出峰组份的调整保留时间。α总大于1。 α↑，说明两峰相距越远，即两组份的分离效果越好，即方法的选择性越好。是对分离方法的评价指标。 第三节 定性和定量分析 一、定性分析 二、定量分析 依据：被测组份的重量（或浓度）与检测器的响应信号 成正比。