复方盐酸麻黄碱滴眼液的盐酸麻黄碱含量测定及临床应用.docVIP

复方盐酸麻黄碱滴眼液的盐酸麻黄碱含量测定及临床应用 【关键词】 复方盐酸麻黄碱 滴眼液 含量测定 临床 应用 　　复方盐酸麻黄碱滴眼液中主要成分为盐酸麻黄碱与氢溴酸后马托品，为本院自制制剂，主要用于预防假性近视。原来采取的化学鉴别与化学滴定法，二个主要成分之间测定有干扰。本科 参考 国内 文献 ［１］，用反相高效液相色谱法(HPLC)测定复方盐酸麻黄碱滴眼液盐酸麻黄碱含量，旨在对药物含量监控，以确保临床用药的安全性。 　　1 HPLC法测定盐酸麻黄碱质量控制［２，３］ 　　1.1 试剂 复方盐酸麻黄碱滴眼液（本院制剂室提供），盐酸麻黄碱对照品为 中国 药品生物制品检定所提供，乙腈为色谱纯（MERCK公司提供），磷酸为色谱纯（TEDIA公司提供），其他试剂为 分析 纯。 　　1.2 方法 与结果 (1)色谱条件：美国Waters 2695高效液相色谱仪、2996PDA检测器，SymmetryC18色谱柱(4.6*150mm,5μm)，流动相：以乙腈-0.2％磷酸溶液（595）；流速1.0mL·min-1，检测波长：210nm，柱温：25。(2)溶液制备：对照品溶液的制备：取盐酸麻黄碱对照品适量，精密称定。用水制成每1ml含60.0μg的溶液即得；供试品溶液的制备：精密量取本品3mL，置于200ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀即得；阴性样品溶液的制备：取不含盐酸麻黄碱的阴性样品，同供试品溶液制备方法制备。(3)阴性干扰试验：在选定的色谱条件下，分别取盐酸麻黄碱对照品溶液、样品溶液和缺盐酸麻黄碱的阴性样品溶液各20μl注入色谱仪，阴性样品在对照品位置无干扰峰（图1）。(4)线性范围考察：精密称取盐酸麻黄碱对照品37.6mg,置于50ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为储备液，然后分别精密量取0.5，1、2、3、4ml分别置于5个25mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，按上述色谱条件，分别进样20μl，以对照品浓度（μg·ml-1）为横坐标（C），峰面积为纵坐标（A），得回归方程A= 41499.66C+76396.06，r＝0.9999 （n＝5）；结果盐酸麻黄碱在15.04～120.32μg·ml-1范围内，峰面积与其浓度线性关系良好。(5)精密度实验：取浓度为63.0μg·ml-1的对照品溶液，连续进样6次，测得盐酸麻黄碱峰面积的RSD＝1.3％，表明仪器精密度良好。(6)稳定性实验：取供试品溶液的制备方法制备的样品溶液，分别与0，2，6及24h各进样1次，测得样品中盐酸麻黄碱峰面积的RSD＝0.9％，结果表明供试品溶液在24h内稳定。(7)重复性实验：取同一批号复方盐酸麻黄碱滴眼液5份，按供试品溶液的制备方法制备成5份供试品溶液，按上述色谱条件进行测定，测得盐酸麻黄碱含量的RSD＝0.2%.结果表明重复性良好。(8)加样回收率：精密量取已测得含量的复方盐酸麻黄碱3ml，置于200ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为样品溶液；精密量取对照品溶液（浓度752.0μg·ml-1）0.5、1.0、2.0 ml,分别置于25 ml容量瓶中，各精密加入样品溶液1ml，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，按样品含量测定法依法测定， 计算 加样回收率(表1)，结果平均回收率为99.8％，RSD＝0.4％，表明本方法回收率良好。(9)样品含量测定：取按“1.2.2”方法制备的供试品溶液和对照品溶液各20μl分别进样测定，按外标法计算盐酸麻黄碱含量应为标示量的90.0％～110.0％。 　　表1 复方盐酸麻黄碱滴眼液的加样回收实验结果（略） 　　2 复方盐酸麻黄碱滴眼液临床 应用 　　选择门诊屈光不正患者89例，年龄6～17岁(平均10.0岁)，随机分成 治疗 组(60例)和对照组(29例)。治疗组给予复方盐酸麻黄碱滴眼液(本院自制)，2次/d，每次1～2滴；对照组用0.25%托吡卡胺滴眼液，每晚1次，每次1～2滴。均7d为1个疗程。按疗效评定标准(痊愈：屈光度恢复正常；显效：屈光度虽未达到正常标准，但较治疗前有明显好转；无效：治疗前后检测指标无明显好转或下降)，治疗组痊愈9例（15.0%），显效47例（78.3%），无效4例（6.7%）；对照组痊愈12例（41.3%），显效16例（55.2%），无效1例（3.4%）。总有效率治疗组93.3%，对照组96.6%，两组差异无显著性（P＞0.05）。 　　3 讨论 　　3.1 HPLC法对复方盐酸麻黄碱滴眼液盐酸麻黄碱测定要素 (1)波长选择：200～400nm波长范围内的紫外扫描显示，盐酸麻黄碱220nm有最大吸收，故选择220nm作为检测波长。(2)流动相选择：实验中曾用多种流动相对复方盐酸麻黄碱滴眼液中组分的分离情况进行考察。结果以乙腈-0.2％磷酸溶液（595）为流动相，盐酸麻黄碱